新冠疫苗有多種，包括滅活疫苗、腺病毒載體疫苗、重組亞單位疫苗和核酸疫苗等。如圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路，圖中①～⑦表示過程，箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)	C↓CATGG	CCATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）圖中①過程需要使用逆轉(zhuǎn)錄酶先得到cDNA，再使用

PCR

PCR

技術(shù)擴(kuò)增得到S基因。完成以后，常采用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物。
（2）為使③過程順利進(jìn)行，需先使用限制酶

NcoⅠ

NcoⅠ

和

NheⅠ

NheⅠ

切割質(zhì)粒B，選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S基因進(jìn)行切割的目的是

防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）

防止S基因自身環(huán)化（防止載體自身環(huán)化、防止S基因與載體反向連接）

（答出一點(diǎn)即可）。
（3）圖中表示篩選的過程是⑤，為達(dá)到利用標(biāo)記基因篩選的目的，普通的P型酵母菌應(yīng)該滿足的條件是

不能合成蔗糖酶，無法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存

不能合成蔗糖酶，無法利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存

。