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研究表明,Lm-PB2蛋白在細胞核內(nèi)起調(diào)節(jié)細胞周期的作用。為研究Lm一PHB2蛋白的生物學(xué)活性,研究人員進行了以下實驗.RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(逆轉(zhuǎn)錄,RT)和cDNA的聚合酶鏈擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù),LacZ基因的編碼產(chǎn)物在X-gal和IPTG存在下,可使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落呈現(xiàn)白色?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)過程①需要的酶有
逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶
逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶
,該過程需要在目的基因上添加適宜的酶切位點,擴增時,引物和酶切位點的設(shè)計依據(jù)分別是
Lm-PHB2基因兩側(cè)的脫氧核苷酸序列
Lm-PHB2基因兩側(cè)的脫氧核苷酸序列
HindⅢ和EcoRI識別的脫氧核苷酸序列
HindⅢ和EcoRI識別的脫氧核苷酸序列

(2)過程③中篩選和培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中需要加入
X-gal、IPTG、卡那霉素
X-gal、IPTG、卡那霉素
和碳源、氮源、水和無機鹽等物質(zhì),挑取
色菌落中的微生物培養(yǎng)并提取質(zhì)粒,用限制酶進行酶切,再對產(chǎn)物進行檢測
(3)為檢測過程⑤得到的大腸桿菌是否表達Lm-PHB2基因,研究人員以注射了
Lm-PHB2蛋白
Lm-PHB2蛋白
后獲得的小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞制備單克隆抗體,之后再用制備的單克隆抗體與大腸桿菌中蛋白質(zhì)進行
抗原一抗體雜交
抗原一抗體雜交
實驗。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶;Lm-PHB2基因兩側(cè)的脫氧核苷酸序列;HindⅢ和EcoRI識別的脫氧核苷酸序列;X-gal、IPTG、卡那霉素;白;Lm-PHB2蛋白;抗原一抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/21 9:0:4組卷:6引用:3難度:0.5
相似題
  • 1.如圖為某生物的一種多肽酶的基因內(nèi)部和周圍的DNA組成情況.其中標出了轉(zhuǎn)錄的起始部位( ini)和終止部位(ter),翻譯的起始密碼子對應(yīng)序列(sta)的第一個堿基的位置,終止密碼子對應(yīng)序列( sto)的第一個堿基的位置,以及基因中內(nèi)含子的界限(↓)(距離以kb表示,但未按比例畫出).
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    (1)轉(zhuǎn)錄的起始部位稱為
     
    ,是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,它是RNA聚合酶
     
    的部位.
    (2)基因工程中的目的基因主要是指
     
    的基因.該基因來自
     
    (填“基因組文庫”或“cDNA文庫”).
    (3)翻譯時與密碼子發(fā)生堿基互補配對的是轉(zhuǎn)運RNA上的反密碼子,該物質(zhì)的主要功能是
     
    .可用抗原-抗體雜交的方法檢驗翻譯的產(chǎn)物,若有
     
    出現(xiàn),則表明目的基因表達出相應(yīng)的產(chǎn)物.
    (4)基因工程在原則上只能產(chǎn)生
     
    的蛋白質(zhì).蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的
     
    及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ).

    發(fā)布:2024/11/2 8:0:1組卷:21引用:2難度:0.1
  • 2.單子葉植物甲具有極強的耐旱性,其耐旱性與某個基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因,并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性較弱的雙子葉植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。請回答下列問題:
    (1)理論上,
     
    文庫含生物的全部基因;而
     
    文庫中含有生物的部分基因。
    (2)若要從植物甲的基因文庫中篩選出耐旱基因,從分子角度看最直接的信息是根據(jù)組成耐旱基因的
     
    排列順序,最間接的信息是根據(jù)耐旱基因翻譯的產(chǎn)物
     
    的特性。
    (3)將耐旱基因?qū)腚p子葉植物乙時,采用最多的方法是
     
    ,再經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再生植株中穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性,除了進行分子水平的
     
    外,有時還需要進行個體生物學(xué)水平的
     
    。
    (4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交,子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比3:1時,則可推測該耐旱基因整合到了
     
    (填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。

    發(fā)布:2024/11/2 8:0:1組卷:1引用:1難度:0.7
  • 3.從基因文庫中獲取目的基因可以根據(jù)下列哪些信息( ?。?br />①基因的核苷酸序列;     ②基因的功能;         ③基因在染色體上的位置;
    ④基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA;   ⑤基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì).

    發(fā)布:2024/11/2 8:0:1組卷:2引用:1難度:0.9
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