我國絨山羊所產的羊絨因品質優(yōu)秀被譽為“軟黃金”而暢銷全球。胸腺素β4(Tβ4)是動物體內一種分布廣泛的多肽,可促進動物毛發(fā)生長。研究者利用基因編輯技術將Tβ4基因定點整合到絨山羊基因組中,獲得新型絨山羊,部分操作過程如圖所示,回答下列問題:
(1)若獲取的Tβ4基因含有非編碼區(qū)和內含子序列,則該基因是從
基因組
基因組
文庫中獲取的,獲取后利用PCR技術對其進行擴增時,需要向反應體系中加入四種dNTP、Tβ4基因(或目的基因)、引物、Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)
Tβ4基因(或目的基因)、引物、Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)
(寫3種物質)等物質。
(2)擴增后的Tβ4基因與質粒結合構建基因表達載體的過程需要用到的工具酶有 限制酶、DNA連接酶
限制酶、DNA連接酶
,通過培養(yǎng)整合有Tβ4基因的受體細胞獲得Tβ4基因定點整合的單克隆細胞群,該過程需要在 5%CO2和95%空氣
5%CO2和95%空氣
氣體環(huán)境中培養(yǎng),且需要定期更換培養(yǎng)液,其目的是 防止細胞代謝產生的有害物質影響細胞增殖(或補充營養(yǎng)物質、創(chuàng)造無菌、無毒環(huán)境)
防止細胞代謝產生的有害物質影響細胞增殖(或補充營養(yǎng)物質、創(chuàng)造無菌、無毒環(huán)境)
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(3)圖中X為 去核的(MⅡ)卵母
去核的(MⅡ)卵母
細胞,獲得的重構胚(重組細胞)需要繼續(xù)培養(yǎng)至 桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
階段,再將其移植到受體母羊體內,從而獲得T4基因定點整合的羔羊。但該技術的成功率非常低,獲得的Tβ4基因定點整合的絨山羊數(shù)量較少,若要快速、大量繁育Tβ4基因定點整合的絨山羊,可以使用的現(xiàn)代生物技術有 體外受精、超數(shù)排卵、胚胎分割(移植)
體外受精、超數(shù)排卵、胚胎分割(移植)
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