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苯丙酮尿癥是由于患者PKU基因突變引起體細(xì)胞中缺少一種酶,致使體內(nèi)的苯丙氨酸代謝異常轉(zhuǎn)化為苯丙酮酸,從而導(dǎo)致患者神經(jīng)系統(tǒng)損害。將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上來(lái)替換突變基因,可用來(lái)研究該病的基因治療過(guò)程。定點(diǎn)整合的過(guò)程是:從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2,根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2,再將兩者分別與基因K1、K2連接,中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因neor,構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換,導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換,如圖所示。回答下列問(wèn)題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)圖中通過(guò)基因定點(diǎn)整合可替換特定基因,該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療,該技術(shù)的應(yīng)用原理屬于
基因重組
基因重組
。該實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠,除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外,還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞
具有發(fā)育的全能性
具有發(fā)育的全能性
。
(2)實(shí)驗(yàn)中小鼠胚胎發(fā)育到囊胚期時(shí),聚集在胚胎一端,個(gè)體較大的細(xì)胞是
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
,可將其取出并分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),將來(lái)可為實(shí)驗(yàn)提供所需的胚胎干細(xì)胞。培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)液除了一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需要添加“兩酸、兩素”以及動(dòng)物血清,其中的“兩酸”是指
氨基酸和核苷酸
氨基酸和核苷酸
,培養(yǎng)過(guò)程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長(zhǎng),當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為
細(xì)胞的接觸抑制
細(xì)胞的接觸抑制

(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí),會(huì)出現(xiàn)PKU基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí),載體的兩個(gè)K基因中至少會(huì)有一個(gè)與neor一起整合到染色體DNA上。已知含有neor的細(xì)胞具有G418的抗性。 K1、K2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),在雙重選擇下存活下來(lái)的是
正確整合(含neor而不含K基因)
正確整合(含neor而不含K基因)
的胚胎干細(xì)胞,理由是
能在含有G418的培養(yǎng)液存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中含neor,能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中不含K基因
能在含有G418的培養(yǎng)液存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中含neor,能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中不含K基因
。
(4)將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠,從個(gè)體生物學(xué)水平檢測(cè),若小鼠尿液中
不含大量苯丙酮酸
不含大量苯丙酮酸
,說(shuō)明PKU基因成功表達(dá)。

【答案】基因重組;具有發(fā)育的全能性;內(nèi)細(xì)胞團(tuán);氨基酸和核苷酸;細(xì)胞的接觸抑制;正確整合(含neor而不含K基因);能在含有G418的培養(yǎng)液存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中含neor,能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說(shuō)明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中不含K基因;不含大量苯丙酮酸
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí),先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     
    。
    (2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
     
    、
     
     
    ,其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開(kāi)始有關(guān)。
    (3)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)如何從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無(wú)抗真菌病的能力?
     
    。
    (5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 2.油菜是世界上重要的油料作物,其生長(zhǎng)期常受到病蟲(chóng)害的危害,其中80%是由病原真菌引起。過(guò)去對(duì)油菜真菌病害的控制主要使用化學(xué)殺菌劑;真菌的細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)組成,現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因(如圖1)注入油菜(本身無(wú)幾丁質(zhì)酶基因)中從而提高油菜的抗真菌能力,該過(guò)程利用了限制性核酸內(nèi)切酶(如圖2)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)據(jù)圖2寫(xiě)出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列:
     
    。形成重組DNA分子時(shí),含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
     
    。
    (2)將重組DNA導(dǎo)入油菜細(xì)胞的常用方法是
     
    。為了檢測(cè)油菜細(xì)胞是否成功導(dǎo)入幾丁質(zhì)酶基因,可利用
     
    制成的探針進(jìn)行檢測(cè)。
    (3)將轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗,過(guò)程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
     
    的配比,幼苗可置于有
     
    的環(huán)境中,檢測(cè)幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達(dá)。
    (4)采用化學(xué)殺蟲(chóng)劑在消滅真菌病害的同時(shí),也污染了
     
    (至少2種)等無(wú)機(jī)環(huán)境,更為重要的是使得
     
    迅速減少。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:3引用:1難度:0.7
  • 3.已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/10/31 13:0:2組卷:46引用:2難度:0.7
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