科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將調(diào)控人體生物鐘的隱花色素基因1(CRY1)轉(zhuǎn)入到豬體細(xì)胞基因組中,然后采用手工克隆技術(shù)(無需過多的儀器設(shè)備和尖端的技術(shù)人員),成功獲得23頭攜帶有人類生物鐘CRY1基因的轉(zhuǎn)基因豬。該研究成果對(duì)生物節(jié)律藥物新靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)及臨床前藥效學(xué)評(píng)價(jià)具有重要的科學(xué)意義和臨床意義。回答下列問題:
(1)采用PCR技術(shù)可獲得大量CRY1基因,PCR反應(yīng)緩沖溶液中一般需添加Mg2+,原因是
DNA聚合酶需要Mg2+激活
DNA聚合酶需要Mg2+激活
。若目的基因中C—G堿基對(duì)所占比例較高,則PCR反應(yīng)過程中變性的溫度會(huì) 升高
升高
。
(2)將CRY1基因?qū)胴i體細(xì)胞中常用的方法是 顯微注射法
顯微注射法
。CRY1基因能夠插入豬體細(xì)胞核基因組中的分子基礎(chǔ)是 它們都是由四種脫氧核苷酸組成的雙螺旋結(jié)構(gòu)
它們都是由四種脫氧核苷酸組成的雙螺旋結(jié)構(gòu)
。
(3)克隆轉(zhuǎn)CRY1基因豬時(shí),將含有CRY1基因的豬體細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,用去核卵母細(xì)胞作為受體的原因是 細(xì)胞體積大,易操作;營養(yǎng)物質(zhì)豐富,能為早期胚胎發(fā)育提供營養(yǎng)物質(zhì);含有能促進(jìn)細(xì)胞核基因表達(dá)的物質(zhì)
細(xì)胞體積大,易操作;營養(yǎng)物質(zhì)豐富,能為早期胚胎發(fā)育提供營養(yǎng)物質(zhì);含有能促進(jìn)細(xì)胞核基因表達(dá)的物質(zhì)
(答三點(diǎn))。核與受體細(xì)胞融合后,需采用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚,目的是使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程
使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程
。
(4)為充分利用早期胚胎,可采用胚胎分割技術(shù)將囊胚期的胚胎進(jìn)行分割,分割時(shí)需要注意 將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
。與傳統(tǒng)克隆技術(shù)相比,手工克隆技術(shù)具有的優(yōu)點(diǎn)有 成本更低、效率更高等
成本更低、效率更高等
(答兩點(diǎn))。