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2023-2024學(xué)年浙江省七彩陽(yáng)光高三(上)開(kāi)學(xué)生物試卷
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試題詳情
金屬硫蛋白(Metallothionein,MT)是由動(dòng)植物和微生物產(chǎn)生的一類低分子量、富含半胱氨酸、具有金屬結(jié)合能力的多肽,具有多種生物學(xué)功能。近年來(lái),因其具有與Zn、Cu、Cd等重金屬的較強(qiáng)結(jié)合能力,而用于生態(tài)修復(fù)。科研人員成功地將人MT蛋白基因用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入番茄,成功培育轉(zhuǎn)基因番茄?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)感受態(tài)農(nóng)桿菌的制備:取保存的根癌農(nóng)桿菌菌落用
接種環(huán)
接種環(huán)
接種于相應(yīng)的液體培養(yǎng)基中,并置于
搖床
搖床
中進(jìn)行振蕩培養(yǎng),完成菌種的活化和擴(kuò)大培養(yǎng);取適量菌液置于低濃度、
低溫
低溫
的CaCl
2
溶液中處理,制得感受態(tài)農(nóng)桿菌。
(2)MT目的基因的獲取和轉(zhuǎn)化:取人肝臟細(xì)胞破碎后提取mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成cDNA,經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增后的產(chǎn)物分別與Ti質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒(如圖),將其與制備好的感受態(tài)農(nóng)桿菌混合,最后進(jìn)行短暫的
熱刺激
熱刺激
處理,使外源DNA轉(zhuǎn)入細(xì)胞;經(jīng)適宜條件培養(yǎng)一段時(shí)間,再加入適宜濃度的
卡那霉素
卡那霉素
篩選出轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌。
(3)轉(zhuǎn)化番茄:取番茄子葉進(jìn)行
消毒
消毒
處理后切段,再與轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌菌液進(jìn)行共培養(yǎng)適宜時(shí)間,取出子葉放在
無(wú)菌濾紙
無(wú)菌濾紙
上吸取多余菌液,再將子葉放在適宜的以
MS
MS
培養(yǎng)基為基礎(chǔ)配制的培養(yǎng)基中進(jìn)行活化和除菌培養(yǎng)。
(4)育成轉(zhuǎn)基因番茄:取上述處理的番茄子葉先經(jīng)
脫分化
脫分化
過(guò)程形成愈傷組織,再經(jīng)發(fā)芽和生根,最后經(jīng)過(guò)
煉苗和移栽
煉苗和移栽
過(guò)程,育成成熟的番茄植株。
(5)轉(zhuǎn)基因番茄性狀的檢測(cè)和生產(chǎn)應(yīng)用:為了檢測(cè)番茄中是否成功導(dǎo)入目的基因,可依據(jù)
T-DNA片段的(部分)序列
T-DNA片段的(部分)序列
設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,再用凝膠電泳技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)的同時(shí)應(yīng)以
未導(dǎo)入質(zhì)粒的野生型番茄
未導(dǎo)入質(zhì)粒的野生型番茄
作為陰性對(duì)照,以農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的番茄作為陽(yáng)性對(duì)照;已知某轉(zhuǎn)基因番茄植物能大量吸收Z(yǔ)n、Cd等元素,且主要富集在根,生產(chǎn)應(yīng)用時(shí)需對(duì)其定期拔除并實(shí)施無(wú)害處理,原因是
避免死亡后根等遺體被分解,鋅再度返回土壤,造成二次污染;及時(shí)拔除植物后,緩解鋅隨食物鏈不斷富集的危害
避免死亡后根等遺體被分解,鋅再度返回土壤,造成二次污染;及時(shí)拔除植物后,緩解鋅隨食物鏈不斷富集的危害
(答出2點(diǎn)即可)。
【考點(diǎn)】
基因工程的操作過(guò)程綜合
.
【答案】
接種環(huán);搖床;低溫;熱刺激;卡那霉素;消毒;無(wú)菌濾紙;MS;脫分化;煉苗和移栽;T-DNA片段的(部分)序列;未導(dǎo)入質(zhì)粒的野生型番茄;避免死亡后根等遺體被分解,鋅再度返回土壤,造成二次污染;及時(shí)拔除植物后,緩解鋅隨食物鏈不斷富集的危害
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/8/3 8:0:9
組卷:4
引用:2
難度:0.5
相似題
1.
幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí),先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
。
(2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
、
、
,其中
與目的基因的轉(zhuǎn)錄開(kāi)始有關(guān)。
(3)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
。
(4)如何從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無(wú)抗真菌病的能力?
。
(5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
。
發(fā)布:2024/10/31 8:0:1
組卷:4
引用:1
難度:0.7
解析
2.
油菜是世界上重要的油料作物,其生長(zhǎng)期常受到病蟲(chóng)害的危害,其中80%是由病原真菌引起。過(guò)去對(duì)油菜真菌病害的控制主要使用化學(xué)殺菌劑;真菌的細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)組成,現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因(如圖1)注入油菜(本身無(wú)幾丁質(zhì)酶基因)中從而提高油菜的抗真菌能力,該過(guò)程利用了限制性核酸內(nèi)切酶(如圖2)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)據(jù)圖2寫(xiě)出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列:
。形成重組DNA分子時(shí),含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
。
(2)將重組DNA導(dǎo)入油菜細(xì)胞的常用方法是
。為了檢測(cè)油菜細(xì)胞是否成功導(dǎo)入幾丁質(zhì)酶基因,可利用
制成的探針進(jìn)行檢測(cè)。
(3)將轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗,過(guò)程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
的配比,幼苗可置于有
的環(huán)境中,檢測(cè)幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達(dá)。
(4)采用化學(xué)殺蟲(chóng)劑在消滅真菌病害的同時(shí),也污染了
(至少2種)等無(wú)機(jī)環(huán)境,更為重要的是使得
迅速減少。
發(fā)布:2024/10/31 8:0:1
組卷:3
引用:1
難度:0.7
解析
3.
已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是( )
A.構(gòu)建重組DNA時(shí),可分別用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割目的基因和質(zhì)粒
B.用限制酶切割上圖中含目的基因的DNA時(shí),會(huì)有四個(gè)磷酸二酯鍵斷裂
C.限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割DNA后獲得的黏性末端不同
D.質(zhì)粒中的標(biāo)記基因便于篩選出目的基因已經(jīng)表達(dá)的細(xì)胞
發(fā)布:2024/10/31 13:0:2
組卷:46
引用:2
難度:0.7
解析
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