為篩選出優(yōu)良的纖維素酶產(chǎn)生菌,某科研團隊從腐木、腐土、腐葉等樣品中采集微生物,配制馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基和羧甲基纖維素瓊脂培養(yǎng)基(后者的配方如下表),分別用于初篩和復(fù)篩,最終分離、純化得到降解纖維素能力較強的木霉1株(T-1)和青霉2株(p-1,P-2)?;卮鹣铝袉栴}:
物質(zhì) |
質(zhì)量或體積 |
物質(zhì) |
質(zhì)量或體積 |
羧甲基纖維素鈉 |
10g |
蛋白胨 |
1g |
(NH4)2S04 |
4g |
瓊脂 |
20g |
KH2PO4 |
2g |
蒸餾水 |
1000ml |
MgSO4?7H2O |
0.5g |
|
|
(1)表中的羧甲基纖維素鈉主要為微生物生長提供
碳源
碳源
,從功能上分析,該培養(yǎng)基屬于
選擇
選擇
培養(yǎng)基。
(2)復(fù)篩的過程中,在培養(yǎng)基中添加適量的剛果紅染料,根據(jù)菌落
是否產(chǎn)生透明圈
是否產(chǎn)生透明圈
,可篩選出分解纖維素的霉菌,原因是
剛果紅不能和纖維素水解后的產(chǎn)物形成紅色復(fù)合物
剛果紅不能和纖維素水解后的產(chǎn)物形成紅色復(fù)合物
。
(3)β-葡萄糖苷酶是一種纖維素酶,能將纖維二糖分解為
葡萄糖
葡萄糖
。為了探究T-1、P-1、P-2這3株霉菌產(chǎn)生β-葡萄糖苷酶的活性選用甘蔗渣作為碳源的發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基,以水楊素(一種纖維二糖)作為酶促反應(yīng)底物,寫出簡要實驗思路:
將3株霉菌分別接種到相同發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基中單獨產(chǎn)酶,各取相同體積的酶液,加入等體積的水楊素分別進行反應(yīng),測量單位時間內(nèi)水楊素的減少量或葡萄糖的增加量
將3株霉菌分別接種到相同發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基中單獨產(chǎn)酶,各取相同體積的酶液,加入等體積的水楊素分別進行反應(yīng),測量單位時間內(nèi)水楊素的減少量或葡萄糖的增加量
。