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菁優(yōu)網(wǎng)癌癥患者進(jìn)行化療或放療之后,體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量大幅度降低,可以注射粒細(xì)胞——巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)增加白細(xì)胞的數(shù)量。在自然條件下,此細(xì)胞因子的含量很低,很難獲得。某科研團(tuán)隊(duì)將人的GMCSF基因?qū)氪竽c桿菌,大量生產(chǎn)重組GM-CSF,滿足了臨床需求?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)從人血液中提取mRNA通過(guò)
反轉(zhuǎn)錄
反轉(zhuǎn)錄
過(guò)程獲得DNA,再以DNA為模板,利用
PCR
PCR
技術(shù)擴(kuò)增GMCSF基因。使用該技術(shù)時(shí),需加入耐高溫的DNA聚合酶,其作用是
催化合成DNA子鏈
催化合成DNA子鏈
。
(2)質(zhì)粒通常含有抗生素抗性基因,該基因的作用是
便于將含入的GMCSF基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)
便于將含入的GMCSF基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)
。構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中,人的GMCSF基因與質(zhì)粒通常使用相同的限制酶進(jìn)行切割,原因是
用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒能產(chǎn)生相同的末端,以便連接
用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒能產(chǎn)生相同的末端,以便連接
。
(3)大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是
繁殖快、為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少
繁殖快、為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少
(答出2點(diǎn))。在添加了該抗生素的培養(yǎng)基中得到了4個(gè)大腸桿菌菌落,從菌落中提取相關(guān)物質(zhì),進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果如圖所示。根據(jù)結(jié)果顯示,應(yīng)選擇
4
4
號(hào)菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

【答案】反轉(zhuǎn)錄;PCR;催化合成DNA子鏈;便于將含入的GMCSF基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái);用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒能產(chǎn)生相同的末端,以便連接;繁殖快、為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少;4
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:1引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.番茄含有豐富的維生素,但不耐寒??茖W(xué)家將魚(yú)的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞,并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株,并將該植株種植在寒冷環(huán)境中,發(fā)現(xiàn)番茄植株并無(wú)抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因,科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)提取細(xì)胞中的
     
    ,采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),若能檢測(cè)到抗凍蛋白,但含量非常少,其原因可能是
     
    。魚(yú)的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是
     
    。
    (2)若經(jīng)上一步檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白,可采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是
     
    ,檢測(cè)過(guò)程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶,說(shuō)明
     
    ,則可能是
     
    導(dǎo)致無(wú)抗凍蛋白。
    (3)若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白的mRNA,使用DNA探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測(cè),若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶,說(shuō)明
     
    ,則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無(wú)法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白基因,說(shuō)明在轉(zhuǎn)化過(guò)程中,可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是
     
    (填“普通質(zhì)?!被颉爸亟M質(zhì)?!保?。

    發(fā)布:2024/11/8 11:0:1組卷:5引用:1難度:0.5
  • 2.運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法,將抗菜青蟲(chóng)的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中,培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)的油菜品種,這一品種在生長(zhǎng)過(guò)程中能產(chǎn)生特異的殺蟲(chóng)蛋白質(zhì),對(duì)菜青蟲(chóng)有顯著抗性,能大大減輕菜青蟲(chóng)對(duì)油菜的危害,提高油菜產(chǎn)量,減少農(nóng)藥使用,據(jù)以上信息,下列敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/7 11:0:1組卷:104引用:32難度:0.7
  • 3.CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞,一時(shí)間讓國(guó)內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法,CAR-T療法的操作步驟是:①直接采取患者的外周血,分離出其中的T淋巴細(xì)胞;②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造,裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子,形成CAR-T細(xì)胞;③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng),大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加;④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi),從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后,這些細(xì)胞一旦遇見(jiàn)表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞,便會(huì)被激活并再擴(kuò)增,發(fā)揮其極大的特異殺傷力,殺死癌細(xì)胞?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞,需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造,以得到CAR-T細(xì)胞。
    ①基因工程最核心的步驟是
     
    。
    ②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是
     
    。
    ③可以通過(guò)PCR技術(shù)獲得大量目的基因,利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為
     
    三步,其中第三步所使用的酶是
     
    。
    (2)體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí),不僅要確保
     
    的環(huán)境條件,還要定期更換培養(yǎng)液,這樣做的目的是
     

    (3)結(jié)合題干信息分析,CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是
     
    (答出2點(diǎn)即可)。

    發(fā)布:2024/11/8 11:59:57組卷:3引用:2難度:0.5
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