鐵皮石斛作為一種集觀賞和藥用價值于一身的重要中藥材，在人們長期掠奪式采挖與生存條件的破壞下，野生資源瀕臨滅絕，藥材價格不斷攀升?，F(xiàn)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的鐵皮石斛遺傳轉(zhuǎn)化方法，不僅能上調(diào)植物有益成分表達(dá)水平，還能增強其抗逆性和抗病蟲能力，同時還能控制其生長發(fā)育進程，以利市場需求。請回答下列問題：
（1）農(nóng)桿菌的活化培養(yǎng)：挑取農(nóng)桿菌于
液體
液體
（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基中活化并擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基中含有0.5%氯化鈉，其作用是 調(diào)節(jié)滲透壓（調(diào)節(jié)滲透壓和提供無機鹽營養(yǎng)）
調(diào)節(jié)滲透壓（調(diào)節(jié)滲透壓和提供無機鹽營養(yǎng)）
。
（2）侵染石斛原球莖：挑選生長狀態(tài)良好、顏色呈嫩綠色、質(zhì)地均勻且較為松散的原球莖置于36-45khz條件下超聲波處理1-3min,把原球莖切割為3-5mm方塊，再對其進行 消毒
消毒
處理后浸入農(nóng)桿菌侵染液。該過程中超聲波和對原球莖進行切割處理的目的是 消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷，有利于提高農(nóng)桿菌的感染效率
消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷，有利于提高農(nóng)桿菌的感染效率
。
（3）共培養(yǎng)和篩選：侵染結(jié)束后，用濾紙吸干原球莖上多余侵染液，然后迅速將原球莖轉(zhuǎn)移至共培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)基中的蔗糖的作用是 提供碳源（提供碳源和維持滲透壓）
提供碳源（提供碳源和維持滲透壓）
。將共培養(yǎng)后的原球莖用 無菌水
無菌水
沖洗4-5次，再用濃度為480-520mg/L的頭孢溶液清洗1-2min,將原球莖用濾紙吸干水分，迅速置于篩選培養(yǎng)基中培養(yǎng)。該過程中使用頭孢類抗生素的作用是 無菌水殺滅農(nóng)桿菌及其他雜菌
無菌水殺滅農(nóng)桿菌及其他雜菌
。
（4）植株再生：將篩選得到的原球莖接種于篩選培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待分化出芽后轉(zhuǎn)入 生根培養(yǎng)基
生根培養(yǎng)基
中培養(yǎng)至組培苗，后要進行煉苗操作，煉苗目的是 提高試管苗對外部環(huán)境的適應(yīng)能力
提高試管苗對外部環(huán)境的適應(yīng)能力
。
（5）實驗過程中用不同種類、濃度的激素對鐵皮石斛原球莖形成愈傷組織和不定芽進行了研究，具體的實驗結(jié)果如下表所示：
| 培養(yǎng)基號 |
培養(yǎng)基（MS） |
6-BA（mg/L） |
2，4-D（mg/L） |
蔗糖（g/L） |
接種數(shù)（個） |
原球莖死亡數(shù)（個） |
誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)（個） |
每塊愈傷不定芽數(shù)（個） |
| 1 |
12 |
0.5 |
1.2 |
30 |
30 |
5 |
25 |
3 |
| 2 |
12 |
1.0 |
1.5 |
20 |
30 |
4 |
26 |
3 |
| 3 |
12 |
1.25 |
0.8 |
25 |
30 |
3 |
27 |
11 |
| 4 |
32 |
0.5 |
1.5 |
25 |
30 |
6 |
24 |
3 |
| 5 |
32 |
1.0 |
0.8 |
30 |
30 |
4 |
26 |
7 |
| 6 |
32 |
1.25 |
1.2 |
20 |
30 |
3 |
27 |
5 |
請分析若要進行大規(guī)模的培養(yǎng)鐵皮石斛，最好選擇
3
3
號培養(yǎng)基，判斷的依據(jù)是
接種相同數(shù)量的原球莖，原球莖死亡數(shù)低，誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)和每塊愈傷不定芽數(shù)高
接種相同數(shù)量的原球莖，原球莖死亡數(shù)低，誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)和每塊愈傷不定芽數(shù)高
。
