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某動(dòng)物體內(nèi)含有某目的基因,研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存,該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因(AmpR)、LacZ基因及一些酶切位點(diǎn),其結(jié)構(gòu)和簡單的操作步驟如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)保存基因技術(shù)的成熟使構(gòu)建某種生物的基因文庫成為可能,重組DNA技術(shù)是保存生物基因的關(guān)鍵技術(shù)。據(jù)圖總結(jié)在受體菌中保存基因的基本步驟:
目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定→保存含目的基因的細(xì)胞(或細(xì)菌)
目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定→保存含目的基因的細(xì)胞(或細(xì)菌)
(用→將各步驟連接)。
(2)在第③步中,為了使質(zhì)粒DNA能與目的基因連接,需要在混合物中加入
DNA連接
DNA連接
酶。若第②步用同一種限制酶處理質(zhì)粒和目的基因,僅考慮1個(gè)目的基因和1個(gè)質(zhì)粒,則在第③步的混合物中,會(huì)形成
2
2
種含目的基因的重組產(chǎn)物。進(jìn)行第④步之前一般用Ca2+對(duì)大腸桿菌進(jìn)行處理,目的是
使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
。
(3)在僅添加了氨芐青霉素的培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞不一定是目的細(xì)胞,請(qǐng)說明理由:
導(dǎo)入不含目的基因的質(zhì)粒的細(xì)胞也能在含有氨芐青霉素成分的培養(yǎng)基上存活
導(dǎo)入不含目的基因的質(zhì)粒的細(xì)胞也能在含有氨芐青霉素成分的培養(yǎng)基上存活
。請(qǐng)對(duì)篩選目的細(xì)胞的操作提出完善意見:
在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素成分的同時(shí)加入X-gal物質(zhì),培養(yǎng)一段時(shí)間后,菌落顏色為白色的即為目的菌落
在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素成分的同時(shí)加入X-gal物質(zhì),培養(yǎng)一段時(shí)間后,菌落顏色為白色的即為目的菌落

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定→保存含目的基因的細(xì)胞(或細(xì)菌);DNA連接;2;使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài);導(dǎo)入不含目的基因的質(zhì)粒的細(xì)胞也能在含有氨芐青霉素成分的培養(yǎng)基上存活;在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素成分的同時(shí)加入X-gal物質(zhì),培養(yǎng)一段時(shí)間后,菌落顏色為白色的即為目的菌落
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/2 8:0:9組卷:2引用:5難度:0.6
相似題
  • 1.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí),先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     
    。
    (2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
     
     
    、
     
    ,其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關(guān)。
    (3)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)如何從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力?
     
    。
    (5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 2.油菜是世界上重要的油料作物,其生長期常受到病蟲害的危害,其中80%是由病原真菌引起。過去對(duì)油菜真菌病害的控制主要使用化學(xué)殺菌劑;真菌的細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)組成,現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因(如圖1)注入油菜(本身無幾丁質(zhì)酶基因)中從而提高油菜的抗真菌能力,該過程利用了限制性核酸內(nèi)切酶(如圖2)。請(qǐng)回答下列問題:
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    (1)據(jù)圖2寫出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列:
     
    。形成重組DNA分子時(shí),含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
     

    (2)將重組DNA導(dǎo)入油菜細(xì)胞的常用方法是
     
    。為了檢測(cè)油菜細(xì)胞是否成功導(dǎo)入幾丁質(zhì)酶基因,可利用
     
    制成的探針進(jìn)行檢測(cè)。
    (3)將轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗,過程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
     
    的配比,幼苗可置于有
     
    的環(huán)境中,檢測(cè)幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達(dá)。
    (4)采用化學(xué)殺蟲劑在消滅真菌病害的同時(shí),也污染了
     
    (至少2種)等無機(jī)環(huán)境,更為重要的是使得
     
    迅速減少。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:3引用:1難度:0.7
  • 3.已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/10/31 13:0:2組卷:46引用:2難度:0.7
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