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PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、
延伸
延伸
。
(2)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
3
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種不同長度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
B
B
。
A.dGTP、dATP、dTTP
B.dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP、dATP、dTTP、dCTP
D.ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
(3)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化
5'→3'
5'→3'
方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA連接酶
解旋酶
解旋酶
、
DNA聚合酶
DNA聚合酶
。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
邊解旋邊復(fù)制
邊解旋邊復(fù)制
,PCR過程的特點(diǎn)是
先完全解旋再復(fù)制
先完全解旋再復(fù)制

【答案】延伸;3;B;5'→3';解旋酶;DNA聚合酶;邊解旋邊復(fù)制;先完全解旋再復(fù)制
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:12引用:1難度:0.7
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  • 1.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請回答有關(guān)問題:菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、
     
     

    (2)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有DNA聚合酶、
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     
    。
    (3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     
    。
    A.dGTP,dATP,dTTP
    B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
    D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
    (4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。
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    催化①過程的酶是
     
    ;核酸酶H的作用是
     
    。如果某RNA單鏈中一共有80個堿基,其中C有15個,A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈 DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為
     
    (以上過程不考慮引物)。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7
  • 2.Sanger法DNA測序技術(shù)的核心原理:由于雙脫氧核苷酸(ddNTP)的2'和3'都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個含有4種脫氧核苷酸(dNTP)的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP(分別為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),在PCR過程中復(fù)制隨機(jī)終止,產(chǎn)生四組不同長度的一系列終止處帶有標(biāo)記的DNA片段。然后在變性凝膠(加入尿素等堿性物質(zhì))上進(jìn)行電泳和放射自顯影后,可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列,具體過程見圖。
    注:ddA是ddATP的縮寫形式。
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    (1)如圖1中Ⅰ過程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是
     
    ,dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是
     
    ,為什么該過程中需要添加引物?
    (2)材料中提到“在變性凝膠上進(jìn)行電泳……”,請解釋“變性”
     
    ,為什么要變性處理?
     

    (3)如果電泳結(jié)果如圖2所示,請寫出待測DNA分子的序列
     
    。
    (4)某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被32P標(biāo)記且以堿基“C”為末端、不同長度的子鏈DNA片段,在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等,還需加入哪些原料
     
    。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:16引用:1難度:0.7
  • 3.在新冠病毒的核酸檢測過程中采用的逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的廣泛應(yīng)用。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增,進(jìn)而獲得檢測的目的基因S。下列關(guān)于RT-PCR的敘述錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/10/31 0:0:1組卷:4引用:1難度:0.6
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