當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年河北省秦皇島市青龍縣高三（上）聯(lián)考生物試卷（10月份）> 試題詳情

回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：

（1）從水稻體細(xì)胞中提取總RNA，利用
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶獲得B基因編碼蛋白的序列，將該序列和Luc基因（表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）連接成的融合基因必須連接到表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間，其中啟動(dòng)子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的結(jié)合位點(diǎn)。
（2）將重組載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)，常用氯化鈣處理農(nóng)桿菌的目的是
增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性
增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性
。處理后再將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移到適宜培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是
使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)
使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)
。
（3）過程②利用了農(nóng)桿菌的T-DNA片段，將目的基因
整合（或轉(zhuǎn)移）
整合（或轉(zhuǎn)移）
到受體細(xì)胞的染色體DNA上，完成后需在培養(yǎng)基中添加
潮霉素
潮霉素
對水稻愈傷組織進(jìn)行脫菌處理。
（4）借助Luc基因的表達(dá)來完成第二次鑒定篩選，具體方法是
檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
。
（5）在植物克隆中，盡量選擇
性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分
性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分
的基因型。有研究人員將上述水稻愈傷組織反復(fù)擴(kuò)增后再誘導(dǎo)，都以失敗告終，原因是在
多次繼代培養(yǎng)
多次繼代培養(yǎng)
后喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄；RNA聚合酶；增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性；使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)；整合（或轉(zhuǎn)移）；潮霉素；檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光；性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分；多次繼代培養(yǎng)

【解答】

【點(diǎn)評】

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發(fā)布：2024/9/27 11:0:2組卷：2引用：2難度：0.7

相似題

1．番茄含有豐富的維生素，但不耐寒?？茖W(xué)家將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞，并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株，并將該植株種植在寒冷環(huán)境中，發(fā)現(xiàn)番茄植株并無抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因，科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析。回答下列問題：
（1）提取細(xì)胞中的

，采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測，若能檢測到抗凍蛋白，但含量非常少，其原因可能是

。魚的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是

。
（2）若經(jīng)上一步檢測確定細(xì)胞中無抗凍蛋白，可采用分子雜交技術(shù)檢測細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是

，檢測過程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測，若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶，說明

，則可能是

導(dǎo)致無抗凍蛋白。
（3）若經(jīng)檢測確定細(xì)胞中無抗凍蛋白的mRNA，使用DNA探針對細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測，若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶，說明

，則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測確定細(xì)胞中無抗凍蛋白基因，說明在轉(zhuǎn)化過程中，可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是

（填“普通質(zhì)?！被颉爸亟M質(zhì)?！保?。
發(fā)布：2024/11/8 11:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析

2．為探究AtCA2ox8基因在擬南芥中的生物學(xué)功能，研究者采用PCR技術(shù)從擬南芥基因組中擴(kuò)增得到了該基因，并采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將該基因?qū)霐M南芥細(xì)胞中，得到了AtGA2ox8基因高表達(dá)的純合轉(zhuǎn)基因擬南芥植株，該植株表現(xiàn)為發(fā)育遲緩。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（　　）

A．利用PCR擴(kuò)增AtGA2ox8基因時(shí)，循環(huán)n次需要消耗引物2ⁿ個(gè)

B．將AtGA2ox8基因?qū)胧荏w細(xì)胞前需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體

C．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因擬南芥的過程中至少要進(jìn)行兩次篩選

D．若AtGA2ox8基因的序列已知，還可通過人工合成的方法獲取該基因

發(fā)布：2024/11/8 22:30:1組卷：17引用：1難度：0.7

解析

3．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞，一時(shí)間讓國內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細(xì)胞；②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造，裝載上具有識別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細(xì)胞；③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)，大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后，這些細(xì)胞一旦遇見表達(dá)對應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞，便會(huì)被激活并再擴(kuò)增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞，需要對其進(jìn)行基因工程改造，以得到CAR-T細(xì)胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是

。
③可以通過PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí)，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是

（答出2點(diǎn)即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
解析

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