蛋白激酶是一類催化蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的酶，能使ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移并結(jié)合到蛋白質(zhì)分子中某些特定氨基酸上，從而改變蛋白質(zhì)的活性。在分子水平的激酶活性檢測中，較為常用的方法是ADP一Glo發(fā)光法，通過檢測激酶反應(yīng)中生成ADP的量來反映激酶活性，該檢測方法主要分為兩個(gè)步驟。首先，在激酶反應(yīng)后加入ADP一Glo試劑，終止激酶反應(yīng)并耗盡剩余ATP；第二步，檢測試劑將ADP還原成ATP，在熒光素酶的作用下，與熒光素反應(yīng)發(fā)出熒光，主要過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}。

（1）在蛋白激酶作用下，ATP分子的

末端

末端

磷酸基團(tuán)脫離下來與蛋白質(zhì)結(jié)合。蛋白質(zhì)磷酸化后活性改變，原因是

蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化

蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化

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（2）進(jìn)行檢測時(shí)，先要耗盡激酶反應(yīng)剩余的ATP，目的是

保證檢測的ATP完全是由激酶反應(yīng)生成的

保證檢測的ATP完全是由激酶反應(yīng)生成的

。根據(jù)檢測結(jié)果可推測物質(zhì)X是

ADP合成的ATP合成酶

ADP合成的ATP合成酶

，生物膜系統(tǒng)中存在該物質(zhì)的膜結(jié)構(gòu)有

線粒體內(nèi)膜、葉綠體類囊體薄膜

線粒體內(nèi)膜、葉綠體類囊體薄膜

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（3）ADP-Glo發(fā)光法可通過熒光信號的強(qiáng)度反映激酶活性，原理是

激酶反應(yīng)中生成ADP的量可反映激酶活性，檢測試劑可將這些ADP轉(zhuǎn)化為ATP，ATP與熒光素反應(yīng)最終發(fā)出熒光，所以熒光信號強(qiáng)度與激酶活性呈正相關(guān)

激酶反應(yīng)中生成ADP的量可反映激酶活性，檢測試劑可將這些ADP轉(zhuǎn)化為ATP，ATP與熒光素反應(yīng)最終發(fā)出熒光，所以熒光信號強(qiáng)度與激酶活性呈正相關(guān)

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（4）有人提出：一定濃度的Hg²⁺會導(dǎo)致蛋白激酶失活。請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對該觀點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)思路是

將一定量的蛋白激酶均分為兩組，一組用一定濃度的Hg²⁺處理，另一組不處理。激酶反應(yīng)一段時(shí)間后，檢測兩組蛋白激酶的活性

將一定量的蛋白激酶均分為兩組，一組用一定濃度的Hg²⁺處理，另一組不處理。激酶反應(yīng)一段時(shí)間后，檢測兩組蛋白激酶的活性

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