孔雀石綠（簡(jiǎn)稱(chēng)MG）是廣泛使用的有機(jī)染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基不透明。

（1）培養(yǎng)基的配制：MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH₂PO₄、KH₂PO₄、NaCl、NH₄Cl、CaCl₂、MgSO₄、水等，再加

MG

MG

作為唯一碳源。培養(yǎng)基配制好后，需用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法進(jìn)行無(wú)菌處理才能后續(xù)使用。
（2）MG高效降解菌株的富集：如圖所示，將1.0g土樣接入含上述配制好的培養(yǎng)液的三角瓶中，將三角瓶置于30℃、180r/min搖床中振蕩培養(yǎng)1～2天，此操作的目的是

目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

，直至培養(yǎng)液變渾濁后，換瓶重復(fù)操作2-3次，以達(dá)到富集的目的。
（3）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

。實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)A中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為1.5×10⁹個(gè)/mL，若要在圖中每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)約為150個(gè)，則應(yīng)將A中的菌液稀釋

10⁶

10⁶

倍。
（4）MG高效降解菌株的鑒定：將純化獲得的菌種接種于含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基（其他營(yíng)養(yǎng)成分等適宜）上，根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn)

透明圈

透明圈

，就可以鑒別出目的菌株，原因是

目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng)，使菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈

目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng)，使菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈

。
（5）MG高效降解菌株的保存：獲得純凈的菌種后，需要進(jìn)行菌種的保藏。若需長(zhǎng)期保存，可以采用

甘油管藏

甘油管藏

的方法。