乙烯是促進(jìn)果實(shí)成熟的激素,高等植物中乙烯生物合成受ACC氧化酶等催化。利用基因工程技術(shù)合成和克隆了河套蜜瓜ACC氧化酶cDNA,并將ACC氧化酶反義基因?qū)牒犹酌酃希ㄔ砣鐖D),已獲得了具有耐儲(chǔ)性狀的河套蜜瓜?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)以河套蜜瓜成熟果實(shí)
RNA
RNA
為模板,通過(guò)反轉(zhuǎn)錄合成ACC氧化酶cDNA,該cDNA只含有本物種的部分基因,其原因是成熟果實(shí)細(xì)胞由于基因的選擇性表達(dá),只會(huì)轉(zhuǎn)錄除一部分基因的產(chǎn)物
成熟果實(shí)細(xì)胞由于基因的選擇性表達(dá),只會(huì)轉(zhuǎn)錄除一部分基因的產(chǎn)物
。
(2)取轉(zhuǎn)化處理的河套蜜瓜幼葉加研磨液研磨,過(guò)濾得上清液,再向上清液中加入酒精可粗提取出DNA,該提取方法的原理是DNA不溶于酒精,但是某些蛋白質(zhì)溶于酒精
DNA不溶于酒精,但是某些蛋白質(zhì)溶于酒精
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(3)制備標(biāo)記的目的基因與從轉(zhuǎn)基因植株中提取DNA
從轉(zhuǎn)基因植株中提取DNA
雜交,如果顯示出雜交帶,就表明ACC氧化酶反義基因整合到宿主細(xì)胞染色體上。
(4)將ACC氧化酶反義基因?qū)牒犹酌酃?,可以獲得具有耐儲(chǔ)性狀的河套蜜瓜的原因是ACC氧化酶反義基因轉(zhuǎn)錄的RNA與ACC氧化酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA結(jié)合,抑制ACC氧化酶合成,從而抑制果實(shí)中乙烯的合成
ACC氧化酶反義基因轉(zhuǎn)錄的RNA與ACC氧化酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA結(jié)合,抑制ACC氧化酶合成,從而抑制果實(shí)中乙烯的合成
,以達(dá)到果實(shí)的延遲成熟和耐儲(chǔ)藏的目的。