針對新冠病毒(SARS-CoV-2)的重組蛋白疫苗、核酸疫苗(包括 DNA疫苗和 RNA疫苗)等疫苗都在研發(fā)當中。如圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路,圖中①~⑦表示過程,虛線箭頭表示 NcoⅠ、SphⅠ、NheI、BamHⅠ的酶切位點(四種酶的識別序列詳見表),標記基因 SUC2控制合成蔗糖酶,使 P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。
限制酶 |
NcoⅠ |
SphⅠ |
NheⅠ |
BamHⅠ |
識別序列和切割位點 |
C↓CATGG |
GCATG↓C |
G↓GATCC |
G↓CTAGC |
(1)圖中①過程需要使用
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶先得到cDNA,再使用
PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))
PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))
技術(shù)擴增得到S基因。
(2)為使③過程順利進行,需先使用限制酶
Ncol
Ncol
和
Nhel
Nhel
切割質(zhì)粒B,選用兩種限制酶對新冠病毒的S基因進行切割的目的是
防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運載體反向連接
防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運載體反向連接
(答出1點即可)。
(3)圖中表示篩選的過程是
⑤
⑤
(填編號),篩選時應(yīng)使用以
蔗糖
蔗糖
為唯一碳源的培養(yǎng)基。
(4)重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后,S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為
抗原
抗原
,刺激機體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體,抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標。參加臨床試驗的志愿者需要滿足的條件之一是
無
無
(選填“有”或“無”)SARS-C。V-2感染史,理由是
有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應(yīng)抗體,對試驗結(jié)果產(chǎn)生干擾
有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應(yīng)抗體,對試驗結(jié)果產(chǎn)生干擾
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