在轉基因抗鹽煙草的研究過程中，采用了圖示質粒。其上有SalⅠ，HindⅢ和BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，獲得此質粒的農桿菌表現出對兩種抗生素的抗性。

（1）在構建重組質粒時，選用
HindⅢ
HindⅢ
和SalⅠ兩種限制酶切割目的基因的兩端及質粒，可防止
目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接
目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接
。其中限制酶SalⅠ切割產生的是
黏性
黏性
末端。
（2）用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農桿菌時，發(fā)現含有目的基因的農桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，這說明
抗四環(huán)素基因被破壞
抗四環(huán)素基因被破壞
。
（3）采用農桿菌感染煙草細胞是因其體內的重組Ti質粒上的
T-DNA
T-DNA
能將目的基因插入到煙草細胞的染色體DNA上。
（4）利用植物組織培養(yǎng)技術培育轉基因抗鹽煙草植株，依據的原理是
植物細胞的全能性
植物細胞的全能性
。
（5）導入抗鹽基因的煙草是否可以表達其遺傳特性，需檢測
抗鹽基因是否轉錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質
抗鹽基因是否轉錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質
，除上述分子水平檢測外還需進行
個體水平上抗鹽
個體水平上抗鹽
鑒定。

【答案】HindⅢ；目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接；黏性；抗四環(huán)素基因被破壞；T-DNA；植物細胞的全能性；抗鹽基因是否轉錄出mRNA，是否翻譯出蛋白質；個體水平上抗鹽

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：28難度：0.6

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2．已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-，根據圖示分析下列敘述正確的是（　?。?br />

A．構建重組DNA時，可分別用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割目的基因和質粒

B．用限制酶切割上圖中含目的基因的DNA時，會有四個磷酸二酯鍵斷裂

C．限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割DNA后獲得的黏性末端不同

D．質粒中的標記基因便于篩選出目的基因已經表達的細胞

發(fā)布：2024/10/31 13:0:2組卷：46引用：2難度：0.7

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