利用基因工程獲取人干擾素-α的方法有兩種：一是將IFN-α基因?qū)爰?xì)菌，從細(xì)胞外分離獲??；二是將IFN-α基因?qū)氘叧嘟湍妇?，結(jié)合現(xiàn)代工藝從細(xì)胞內(nèi)獲取。請回答：
（1）基因工程中構(gòu)建的表達(dá)載體一般包括

復(fù)制原點(diǎn)

復(fù)制原點(diǎn)

、標(biāo)記基因、啟動子序列、目的基因和終止子序列。其中標(biāo)記基因的作用是

篩選重組質(zhì)粒

篩選重組質(zhì)粒

，啟動子是

RNA聚合

RNA聚合

酶的結(jié)合位點(diǎn)。
（2）微生物代謝中合成用于自身生長發(fā)育的物質(zhì)稱為初級代謝產(chǎn)物，隨后產(chǎn)生并分泌到細(xì)胞外的生物堿、抗菌素及細(xì)菌毒素稱為次級代謝產(chǎn)物。將IFN-α基因?qū)爰?xì)胞，由于缺少細(xì)胞器

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

參與肽鏈的加工導(dǎo)致表達(dá)的干擾素-α無糖鏈結(jié)構(gòu)；從產(chǎn)物角度分析，將該基因?qū)虢湍妇c導(dǎo)入細(xì)菌相比獲得的抗生素更純且活性更高的原因有

細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外；避免細(xì)菌毒素的副作用

細(xì)胞內(nèi)合成不需要分泌到細(xì)胞外；避免細(xì)菌毒素的副作用

。（答兩點(diǎn)）。
（3）畢赤酵母菌在發(fā)酵罐中具有高密度的特點(diǎn)，下圖示營養(yǎng)比例及氧氣含量對酵母菌產(chǎn)干擾素-α的影響結(jié)果。
①酵母菌培養(yǎng)基中的蛋白粉被用作

氮源

氮源

。
②5%O₂條件下，后期干擾素-α合成量急劇下降的原因可能是

酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精

酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精

毒害酵母菌。制備酵母培養(yǎng)基的過程中，除了配制相關(guān)的營養(yǎng)成分外，還需要

適宜的溫度和pH

適宜的溫度和pH

保證酶的活性。生產(chǎn)上為節(jié)約成本，一般在發(fā)酵的后期可通過補(bǔ)充

適當(dāng)比例的碳源和氮源

適當(dāng)比例的碳源和氮源

并適當(dāng)

通入純凈空氣

通入純凈空氣

。