當(dāng)前位置： 2023年江蘇省揚(yáng)州中學(xué)高考生物適應(yīng)性試卷> 試題詳情

偽狂犬病與乙腦在我國豬群中廣泛存在，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的持續(xù)發(fā)展造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為此，研究人員擬以偽狂犬病毒為載體，構(gòu)建乙腦病毒主要免疫原性基因PrM重組病毒，為研究豬乙腦病毒與偽狂犬病毒雙價(jià)基因工程疫苗奠定基礎(chǔ)。下圖表示表達(dá)乙腦病毒PrM基因重組偽狂犬病病毒的構(gòu)建過程，PK、gG、gD為偽狂犬病的主要抗原基因，TK為偽狂犬病的毒性基因，pgG為啟動(dòng)子，BamHⅠ和EcoRⅠ為兩種限制酶。請(qǐng)分析回答：

（1）催化過程①的酶有
反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶
反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶
，RT-PCR的進(jìn)行應(yīng)先設(shè)計(jì)針對(duì)PrM基因的特異性引物，下列可作為該過程的一對(duì)引物是
P1和P4
P1和P4
。
P1：5'TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG3'
P2：5'CACAAGCTTAGATGACGTATCCAAGGAG3'
P3：5'TACGGTACCTTAGGGGTTAAGTGGG3'
P4：5'GCGAATTCTAACTGTAAGCCGGAGCG3'
（2）過程②在
DNA連接
DNA連接
酶的作用下可形成重組轉(zhuǎn)移載體，研究人員通過BamHⅠ和EcoRⅠ雙酶切后再電泳的方法進(jìn)行重組轉(zhuǎn)移載體的鑒定篩選，請(qǐng)?jiān)趫D2中畫出通用轉(zhuǎn)移載體和重組轉(zhuǎn)移載體酶切并電泳后條帶的大致位置。
（3）研究發(fā)現(xiàn)，偽狂犬病毒在細(xì)胞中增殖的非必需基因占病毒基因組的一半以上，因此，以該病毒為載體的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在
插入外源基因的區(qū)域多而不影響其本身的繁殖
插入外源基因的區(qū)域多而不影響其本身的繁殖
，過程③采用脂質(zhì)體介導(dǎo)共轉(zhuǎn)染PK-15細(xì)胞的原理是
細(xì)胞質(zhì)膜的流動(dòng)性
細(xì)胞質(zhì)膜的流動(dòng)性
。
（4）偽狂犬病毒缺失TK、gG等基因會(huì)顯著降低毒力，但不會(huì)影響自身正常繁殖，故重組病毒理論上具有的特點(diǎn)是
能侵染宿主細(xì)胞但不具有致病性
能侵染宿主細(xì)胞但不具有致病性
，若檢測(cè)重組病毒中PrM基因是否成功表達(dá)，可采用的方法是
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
。
（5）該重組病毒能否直接作為基因工程疫苗投入使用，還需要進(jìn)一步探究。請(qǐng)你利用所學(xué)的知識(shí)簡要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：
給多只健康且生理狀態(tài)相同的豬接種一定劑量的重組病毒，定期觀察其生長情況并檢測(cè)血漿中相應(yīng)的抗體水平
給多只健康且生理狀態(tài)相同的豬接種一定劑量的重組病毒，定期觀察其生長情況并檢測(cè)血漿中相應(yīng)的抗體水平
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．

【答案】反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶；P1和P4；DNA連接；插入外源基因的區(qū)域多而不影響其本身的繁殖；細(xì)胞質(zhì)膜的流動(dòng)性；能侵染宿主細(xì)胞但不具有致病性；抗原—抗體雜交；給多只健康且生理狀態(tài)相同的豬接種一定劑量的重組病毒，定期觀察其生長情況并檢測(cè)血漿中相應(yīng)的抗體水平

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/7 8:0:9組卷：19引用：1難度：0.5

相似題

1．番茄含有豐富的維生素，但不耐寒?？茖W(xué)家將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞，并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株，并將該植株種植在寒冷環(huán)境中，發(fā)現(xiàn)番茄植株并無抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因，科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析?；卮鹣铝袉栴}：
（1）提取細(xì)胞中的

，采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，若能檢測(cè)到抗凍蛋白，但含量非常少，其原因可能是

。魚的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是

。
（2）若經(jīng)上一步檢測(cè)確定細(xì)胞中無抗凍蛋白，可采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是

，檢測(cè)過程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶，說明

，則可能是

導(dǎo)致無抗凍蛋白。
（3）若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無抗凍蛋白的mRNA，使用DNA探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶，說明

，則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無抗凍蛋白基因，說明在轉(zhuǎn)化過程中，可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是

（填“普通質(zhì)?！被颉爸亟M質(zhì)?！保?。
發(fā)布：2024/11/8 11:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析

2．為探究AtCA2ox8基因在擬南芥中的生物學(xué)功能，研究者采用PCR技術(shù)從擬南芥基因組中擴(kuò)增得到了該基因，并采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將該基因?qū)霐M南芥細(xì)胞中，得到了AtGA2ox8基因高表達(dá)的純合轉(zhuǎn)基因擬南芥植株，該植株表現(xiàn)為發(fā)育遲緩。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>

A．利用PCR擴(kuò)增AtGA2ox8基因時(shí)，循環(huán)n次需要消耗引物2ⁿ個(gè)

B．將AtGA2ox8基因?qū)胧荏w細(xì)胞前需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體

C．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因擬南芥的過程中至少要進(jìn)行兩次篩選

D．若AtGA2ox8基因的序列已知，還可通過人工合成的方法獲取該基因

發(fā)布：2024/11/8 22:30:1組卷：17引用：1難度：0.7

解析

3．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞，一時(shí)間讓國內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細(xì)胞；②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造，裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細(xì)胞；③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)，大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后，這些細(xì)胞一旦遇見表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞，便會(huì)被激活并再擴(kuò)增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞，需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造，以得到CAR-T細(xì)胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是

。
③可以通過PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí)，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是

（答出2點(diǎn)即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
解析

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