新冠病毒（+RNA）的刺突蛋白S通過與人體黏膜細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合而進(jìn)入細(xì)胞，是宿主抗體的重要作用位點(diǎn)。如圖1是科研人員利用新冠病毒的+RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結(jié)合域RBD基因作為抗原基因序列，研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術(shù)路線。已知PCR1與PCR2要分別進(jìn)行，然后將產(chǎn)物混合，使用引物1和引物4進(jìn)行PCR3，最終獲得大量S-RBD融合基因（1300bp）。
（1）新冠病毒囊膜主要由
蛋白質(zhì)和磷脂
蛋白質(zhì)和磷脂
組成，囊膜上蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所在 宿主細(xì)胞的核糖體（或宿主細(xì)胞的核糖體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）
宿主細(xì)胞的核糖體（或宿主細(xì)胞的核糖體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）
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（2）PCR3過程中，片段1與片段2連接形成S-RBD融合基因，需要使用 耐高溫的DNA聚合（Taq酶）
耐高溫的DNA聚合（Taq酶）
酶，該酶的作用是 將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3’端
將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到引物的3’端
。為使S-RBD融合基因能與pX質(zhì)粒相連接，并在工程菌中表達(dá)時(shí)先合成S蛋白，則PCR1過程中，應(yīng)在引物1的5′端添加的限制酶序列是 5'CATATG3'
5'CATATG3'
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（3）為初步檢測(cè)過程B構(gòu)建是否成功，對(duì)重組pX系列質(zhì)粒及其酶切產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖2。據(jù)圖可知，酶切時(shí)用到的酶是 HindⅢ、Ndel、EcoRI
HindⅢ、Ndel、EcoRI
，重組質(zhì)粒pX2和pX5構(gòu)建成功的依據(jù)是 重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對(duì)總和為S—RBD融合基因長(zhǎng)度1300
重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對(duì)總和為S—RBD融合基因長(zhǎng)度1300
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（4）在工程菌的篩選時(shí)，可先后用兩種抗生素進(jìn)行影印培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)（即使用無菌的絨氈布?jí)涸谂囵B(yǎng)基A的菌落上，帶出少許菌種，平移并壓在培養(yǎng)基B上），在培養(yǎng)基B中存活的菌落是否含有目的基因 否
否
（填“是”或“否”）。鑒定重組pX質(zhì)粒是否導(dǎo)入工程菌還可以采用的方法是 觀察菌落是否具有熒光
觀察菌落是否具有熒光
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（5）試從免疫學(xué)角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢(shì)的原因 此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進(jìn)入靶細(xì)胞，從而激發(fā)細(xì)胞免疫
此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進(jìn)入靶細(xì)胞，從而激發(fā)細(xì)胞免疫
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