將PV病毒外殼蛋白基因(PVY-CP)導(dǎo)入馬鈴薯,并使之表達(dá)即可獲得抗PVY病毒馬鈴薯。如圖1是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作,PVY-CP可以從質(zhì)粒A中獲??;質(zhì)粒B是選用的運(yùn)載體,另已知部分限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn):
BamHⅠ |
HindⅢ |
BglⅡ |
SmaⅠ |
G↓ GATCC CCTAG↑G |
A↓ AGCTT TTCGA↑A |
A↓ GATCT TCTAG↑A |
CCC↓GGG GGG↑CCC |
請(qǐng)結(jié)合圖像,運(yùn)用所學(xué)知識(shí)回答問題:
(1)含有PVY-CP的質(zhì)粒A保存在某細(xì)菌群體中,各個(gè)細(xì)菌含有相關(guān)不同的基因,這樣的細(xì)菌群體稱為
基因文庫(kù)(部分基因文庫(kù)、基因組文庫(kù))
基因文庫(kù)(部分基因文庫(kù)、基因組文庫(kù))
。
(2)PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,如圖2的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能,這是因?yàn)?
DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的引物鏈(DNA單鏈)上
DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的引物鏈(DNA單鏈)上
。
(3)關(guān)于步驟②中 Klenow酶的猜測(cè),合理的有
ABC
ABC
。
A.降低化學(xué)反應(yīng)的活化能
B.可以將DNA片段的粘性末端變成平末端
C.能催化DNA鏈的合成
D.與DNA連接酶的功能相同
(4)步驟④中應(yīng)該使用的限制酶是
BglⅡ、SmaⅠ
BglⅡ、SmaⅠ
。
(5)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行轉(zhuǎn)化,首先需要將質(zhì)粒C導(dǎo)入
農(nóng)桿菌
農(nóng)桿菌
中,進(jìn)而轉(zhuǎn)化馬鈴薯,一般情況下,不能直接用未處理的農(nóng)桿菌菌作為受體細(xì)胞,原因是
未處理的農(nóng)桿菌吸收外源DNA的能力極弱
未處理的農(nóng)桿菌吸收外源DNA的能力極弱
。