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下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：
限制酶 BamHⅠ HindSⅢ EcoRⅠ SmaⅠ
識別序列及切割位點 G↓GATCC
CCTAG↓G 		A↓AGCTT
TTCGA↓A 		G↓AATTC
CTTAA↓G 		CCC↓GGG
GGG↓CCC
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（1）EcoRI斷開的是
鳥嘌呤脫氧核苷酸
鳥嘌呤脫氧核苷酸
和 
腺嘌呤脫氧核苷酸
腺嘌呤脫氧核苷酸
 之間的
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
鍵。一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有
0，2
0，2
 個游離的磷酸基團。
（2）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越
高
高
。
（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是
會破壞質(zhì)粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因
會破壞質(zhì)粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因
。
（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以實現(xiàn)
目的基因和質(zhì)粒的定向連接
目的基因和質(zhì)粒的定向連接
。BamHⅠ切割DNA后形成的是
黏性
黏性
末端，寫出該末端
-CTAG或GATC-
-CTAG或GATC-
。
（5）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了
鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞
鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞
。如果是四環(huán)素抗性基因，可以在培養(yǎng)基中加
四環(huán)素
四環(huán)素
來幫助實現(xiàn)該作用。
（6）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在
四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。

【答案】鳥嘌呤脫氧核苷酸；腺嘌呤脫氧核苷酸；磷酸二酯鍵；0，2；高；會破壞質(zhì)粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因；目的基因和質(zhì)粒的定向連接；黏性；-CTAG或GATC-；鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞；四環(huán)素；四環(huán)素
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：1難度：0.7
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　　）

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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