熒光定量PCR技術可定量檢測樣本中的DNA含量，其原理是：在PCR反應體系中加入與某條模板鏈互補的熒光探針，當TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處時會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成，如圖1所示；在某次檢測過程中，得到一條熒光強度的變化曲線，如圖2所示，其中閾值是指反應過程中達到設定閾值時所經歷的循環(huán)數(shù)。回答下列問題：

（1）PCR技術的原理是

DNA半保留復制

DNA半保留復制

，子鏈延伸的方向是5′端→3′端，原因是

DNA聚合酶只能從引物的3'端添加脫氧核苷酸

DNA聚合酶只能從引物的3'端添加脫氧核苷酸

。
（2）研究人員利用PCR技術特異性地擴增DNA的過程中，向PCR擴增儀中加入了MgCl₂，脫氧核苷酸、引物和模板DNA等物質，其中MgCl₂的作用是

激活DNA聚合酶

激活DNA聚合酶

，該過程需要加入耐高溫的DNA聚合酶，不需要加入解旋酶的原因是

PCR利用高溫使DNA雙鏈解開

PCR利用高溫使DNA雙鏈解開

。在PCR擴增完成后，常使用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

 法來鑒定PCR的產物。
（3）當PCR循環(huán)到一定次數(shù)時，會出現(xiàn)“平臺期”，即熒光強度不再增加，此時限制因素可能是

熒光探針的數(shù)量、引物的數(shù)量、原料的數(shù)量

熒光探針的數(shù)量、引物的數(shù)量、原料的數(shù)量

（答出2點）。
（4）為了讓哺乳動物能夠批量生產藥物，研究人員將利用PCR技術獲取的藥用蛋白基因與乳腺中特異性表達的基因的啟動子等調控元件重組在一起，通過

顯微注射

顯微注射

的方法導入哺乳動物的受精卵中，導入并培育成功后，該藥用蛋白基因在

乳腺

乳腺

細胞中表達。