玉米是重要的糧食作物，其葉片細(xì)胞中的 P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米，回答下列問(wèn)題。
（1）利用PCR技術(shù)以圖 1中的DNA片段為模板擴(kuò)增P基因，需要的引物有
BC
BC
（從A、B、C、D四種單鏈 DNA片段中選擇）。
（2）培育超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米過(guò)程中所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖2所示。強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被 RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用 BamHⅠ和SacⅠ
BamHⅠ和SacⅠ
酶組合，將片段和Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是
將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上
將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上
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（3）將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入 潮霉素
潮霉素
進(jìn)行篩選，篩選出的愈傷組織 （再）分化
（再）分化
形成叢芽，最終獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米株系。
（4）P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖3所示，不能選擇a4玉米株系作為超量表達(dá) P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究的實(shí)驗(yàn)材料，理由是 a4玉米株系的P蛋白表達(dá)量與野生型玉米差異不顯著
a4玉米株系的P蛋白表達(dá)量與野生型玉米差異不顯著
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