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血凝素基因(HA)編碼的血凝素是構(gòu)成流感病毒包膜纖突的主要成分。成熟的血凝素包含HA1和HA2兩個(gè)亞單位,其中HA1含有病毒與受體相互作用的位點(diǎn)。人IgG抗體中的一段小肽,常作為融合蛋白標(biāo)簽,由IgGFc基因的片段(長度為717bp)編碼。蛋白質(zhì)分泌依賴于信號肽的引導(dǎo),本研究中用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽,科研人員嘗試構(gòu)建IL-2SS/HA1/IgGFc融合蛋白表達(dá)載體,并導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)和分泌。請回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)流感病毒包膜主要由
蛋白質(zhì)和磷脂
蛋白質(zhì)和磷脂
組成,包膜上血凝素的合成場所在
宿主細(xì)胞的核糖體
宿主細(xì)胞的核糖體
。
(2)本實(shí)驗(yàn)用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽有利于融合蛋白分泌到大腸桿菌細(xì)胞外,PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)應(yīng)該選擇圖中引物
bc
bc
。設(shè)計(jì)引物時(shí),不能包含基因HA1的終止密碼子的編碼序列,原因是
防止產(chǎn)生的HA1上不含IgGFc標(biāo)簽(或防止IgGFc基因不表達(dá))
防止產(chǎn)生的HA1上不含IgGFc標(biāo)簽(或防止IgGFc基因不表達(dá))
。
(3)應(yīng)選擇限制酶
EcoRV
EcoRV
來切割質(zhì)粒A,然后直接將PCR產(chǎn)物與質(zhì)粒A混合,同時(shí)加入
T4
T4
DNA連接酶,使得目的基因與質(zhì)粒A相連。若目的基因與質(zhì)粒A正向連接,用BamH和SacI同時(shí)切割重組質(zhì)粒,完全酶切后的產(chǎn)物中短片段的長度約為
1061
1061
bp。
(4)有時(shí)為了滿足應(yīng)用需要,會在載體中人工構(gòu)建誘導(dǎo)型啟動(dòng)子,當(dāng)誘導(dǎo)物存在時(shí),可以
激活或者抑制目的基因的表達(dá)
激活或者抑制目的基因的表達(dá)

(5)圖示中的限制酶有的來自于大腸桿菌,但限制酶不能切割大腸桿菌本身的DNA分子,原因是
本身不具備該酶的識別序列(或識別序列已經(jīng)發(fā)生了甲基化)
本身不具備該酶的識別序列(或識別序列已經(jīng)發(fā)生了甲基化)
。

【答案】蛋白質(zhì)和磷脂;宿主細(xì)胞的核糖體;bc;防止產(chǎn)生的HA1上不含IgGFc標(biāo)簽(或防止IgGFc基因不表達(dá));EcoRV;T4;1061;激活或者抑制目的基因的表達(dá);本身不具備該酶的識別序列(或識別序列已經(jīng)發(fā)生了甲基化)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/7 8:0:9組卷:21引用:2難度:0.5
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  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     

    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對)的長鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為(  )

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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