子宮內膜異位癥患者常伴有不孕癥狀,患者腹腔液中含有較高濃度的白細胞介素(IL)。為探明腹腔液中存在的IL對生殖活動的影響,科研人員利用重組人IL-1β、IL-5、IL-6對小鼠體外受精及早期胚胎發(fā)育的影響進行了研究?;卮鹣铝袉栴}:
(1)實驗過程中,需要從雌性小鼠體內獲得多枚卵母細胞,一般可采取的方法是
向多只雌性小鼠注射一定量的促性腺激素,從輸卵管沖出多枚卵母細胞
向多只雌性小鼠注射一定量的促性腺激素,從輸卵管沖出多枚卵母細胞
。用電刺激法刺激雄性小鼠的射精中樞獲得精子,經獲能
獲能
處理后,將精子與成熟的卵母細胞在HTF基礎培養(yǎng)液中混合培養(yǎng),完成受精。為了培養(yǎng)的細胞能正常生長繁殖,需要保持培養(yǎng)液無菌、無毒
無菌、無毒
的環(huán)境。
(2)將處理后的精子和卵細胞置于HTF基礎培養(yǎng)液中進行不同處理,培養(yǎng)適宜時間后,觀察受精情況,得到的實驗結果如圖所示。
實驗組的處理方法是向每組HTF基礎培養(yǎng)液中按比例分別添加IL-1β、IL-5、IL-6中的一種,控制白細胞介素的濃度分別為0.05 ng?mL-1、0.5 ng?mL-1、5 ng?mL-1、50 ng?mL-1
向每組HTF基礎培養(yǎng)液中按比例分別添加IL-1β、IL-5、IL-6中的一種,控制白細胞介素的濃度分別為0.05 ng?mL-1、0.5 ng?mL-1、5 ng?mL-1、50 ng?mL-1
。培養(yǎng)后取培養(yǎng)液用顯微鏡觀察,若觀察到卵細胞膜和透明帶的問隙中有兩個極體
卵細胞膜和透明帶的問隙中有兩個極體
,則卵細胞已完成受精。分析實驗結果,可得出的結論是IL能抑制小鼠受精,且隨濃度升高,抑制作用增強
IL能抑制小鼠受精,且隨濃度升高,抑制作用增強
。
(3)若要為研究IL對小鼠早期胚胎發(fā)育的影響,則需要利用上述培養(yǎng)液,繼續(xù)觀察統(tǒng)計不同發(fā)育時期胚胎的發(fā)育情況(成活率)
不同發(fā)育時期胚胎的發(fā)育情況(成活率)
。