基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來(lái)的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問(wèn)題：

注：neo^r是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無(wú)毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到

載體（或質(zhì)粒）

載體（或質(zhì)粒）

上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。
（2）打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后，利用

限制

限制

酶，將之線性化，以提高重組率。通過(guò)

顯微注射

顯微注射

技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會(huì)發(fā)生同源重組。
（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入

新霉素和丙氧鳥苷

新霉素和丙氧鳥苷

。最后還需要通過(guò)

DNA分子雜交

DNA分子雜交

技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行

液氮（或冷凍）

液氮（或冷凍）

保存。
（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、

生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）

生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）

的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對(duì)受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長(zhǎng)大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過(guò)的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的

生殖細(xì)胞

生殖細(xì)胞

（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過(guò)了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過(guò)的小鼠。