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基因編輯與基因工程
Cre-loxP系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特定基因的敲除,其技術(shù)過(guò)程如圖1所示。
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(1)Cre酶能隨機(jī)識(shí)別DNA分子上的兩個(gè)相同的loxP序列,并在其中的特定位點(diǎn)切斷DNA雙鏈,其功能類(lèi)似于基因工程中的
限制
限制
酶。重新連接切口后,保留圖1中片段
2
2
(填序號(hào)),就能實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的敲除。
(2)“腦彩虹”是一項(xiàng)最新的大腦成像技術(shù),通過(guò)熒光蛋白“點(diǎn)亮”大腦內(nèi)的神經(jīng)元,幫助科學(xué)家了解大腦。
Ⅰ.研究者設(shè)計(jì)圖2所示的DNA片段。若已知三種熒光蛋白的氨基酸序列,則可通過(guò)
化學(xué)方法人工合成
化學(xué)方法人工合成
的方法獲得相關(guān)基因,再利用限制酶和
DNA連接
DNA連接
酶將三種熒光蛋白基因和兩種loxP序列、啟動(dòng)子M與運(yùn)載體連接,形成
重組DNA分子
重組DNA分子
,將其導(dǎo)入小鼠的
受精卵
受精卵
細(xì)胞中,經(jīng)過(guò)篩選、培育,獲得轉(zhuǎn)基因小鼠。
Ⅱ.在Cre酶的幫助下,一些熒光蛋白基因可能會(huì)被隨機(jī)“剪掉”,但兩個(gè)loxP1或兩個(gè)loxP2之間的基因,最多會(huì)被Cre酶敲除一次。同時(shí)該轉(zhuǎn)基因小鼠細(xì)胞內(nèi)存在連接有啟動(dòng)子N(由信號(hào)分子X(jué)開(kāi)啟)的Cre酶基因,因此該小鼠“腦彩虹”的出現(xiàn)可受X的調(diào)控:
①若無(wú)X作用時(shí),該小鼠腦組織的色彩為
色,其他組織細(xì)胞顏色為
無(wú)
無(wú)
色。
②有信號(hào)分子X(jué)作用時(shí),該小鼠腦組織出現(xiàn)“腦彩虹”,請(qǐng)闡述機(jī)理:
有X作用時(shí),該小鼠腦組織細(xì)胞啟動(dòng)Cre酶表達(dá),但不同腦細(xì)胞中Cre酶識(shí)別的loxP序列或作用結(jié)果可能不同有可能隨機(jī)敲除兩個(gè)loxP1之間的紅色熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞為黃色;有可能敲除兩個(gè)loxP2之間的紅色和黃色熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞藍(lán)色;也有可能未成功敲除熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞為紅色。不同腦細(xì)胞差異表達(dá)紅色、黃色或藍(lán)色熒光蛋白基因,出現(xiàn)“腦彩虹”
有X作用時(shí),該小鼠腦組織細(xì)胞啟動(dòng)Cre酶表達(dá),但不同腦細(xì)胞中Cre酶識(shí)別的loxP序列或作用結(jié)果可能不同有可能隨機(jī)敲除兩個(gè)loxP1之間的紅色熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞為黃色;有可能敲除兩個(gè)loxP2之間的紅色和黃色熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞藍(lán)色;也有可能未成功敲除熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞為紅色。不同腦細(xì)胞差異表達(dá)紅色、黃色或藍(lán)色熒光蛋白基因,出現(xiàn)“腦彩虹”
。

【答案】限制;2;化學(xué)方法人工合成;DNA連接;重組DNA分子;受精卵;紅;無(wú);有X作用時(shí),該小鼠腦組織細(xì)胞啟動(dòng)Cre酶表達(dá),但不同腦細(xì)胞中Cre酶識(shí)別的loxP序列或作用結(jié)果可能不同有可能隨機(jī)敲除兩個(gè)loxP1之間的紅色熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞為黃色;有可能敲除兩個(gè)loxP2之間的紅色和黃色熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞藍(lán)色;也有可能未成功敲除熒光蛋白基因,此時(shí)為細(xì)胞為紅色。不同腦細(xì)胞差異表達(dá)紅色、黃色或藍(lán)色熒光蛋白基因,出現(xiàn)“腦彩虹”
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:36引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.城市降雨徑流中含多種污染物,其中有機(jī)物多環(huán)芳烴(PAHs)具有極強(qiáng)生物毒性,常積累于路邊滯留池中,產(chǎn)生持久的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。研究者構(gòu)建了一種高效降解PAHs的工程菌用于生態(tài)修復(fù)。
    (1)生態(tài)修復(fù)效果除受工程菌的降解能力限制外,還與工程菌和本地微生物之間的
     
    等有關(guān)。研究者調(diào)研滯留池中PAHs種類(lèi),發(fā)現(xiàn)以芘為主。將滯留池土壤溶液接種于添加芘的培養(yǎng)基中,篩選獲得三種菌株,再分別接種于芘作唯一碳源的培養(yǎng)基中,均無(wú)法形成菌落,說(shuō)明三者均對(duì)芘有一定的
     
    ,但無(wú)法降解芘。最終篩選獲得基因工程改造的受體菌。
    (2)將控制高效降解PAHs的RHD基因與綠色熒光蛋白基因(CFP基因)融合后構(gòu)建重組質(zhì)粒,導(dǎo)入受體菌獲得工程菌。分別提取工程菌的擬核DNA與質(zhì)粒,PCR結(jié)果如圖1,可知目的基因
     
    。
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    (3)將工程菌培養(yǎng)在以芘為唯一碳源的培養(yǎng)基中,檢測(cè)熒光強(qiáng)度及芘含量隨時(shí)間的變化,結(jié)果如圖2。
    據(jù)圖可知,熒光強(qiáng)度可作為工程菌降解芘的指標(biāo),依據(jù)是
     
    。
    (4)工程菌在特定條件下自毀可降低生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。利用以下材料,提出可自毀的工程菌的設(shè)計(jì)思路。
    T質(zhì)粒,核酸水解酶基因(nuc基因),lac啟動(dòng)子,IPTG(可誘導(dǎo)lac啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄)
     

    (5)后續(xù)評(píng)價(jià)了可自毀工程菌對(duì)微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。綜合上述研究,完善技術(shù)路線圖。
     

    發(fā)布:2024/11/7 19:30:1組卷:41引用:1難度:0.6
  • 2.酵母人工染色體(YAC)是由酵母細(xì)胞中必需的端粒、著絲粒和復(fù)制起始序列等與目的基因和質(zhì)粒構(gòu)建成的表達(dá)載體。如圖表示利用整合有人源抗體IgM基因的YAC,培育能分泌人源抗體的小鼠的三個(gè)技術(shù)路線圖。下列相關(guān)敘述正確的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/8 14:0:1組卷:25引用:2難度:0.6
  • 3.我國(guó)科學(xué)家利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)將150CAG重復(fù)序列精確地插入豬成纖維細(xì)胞內(nèi)的亨廷頓蛋白(HTT)內(nèi)源性基因中,并成功培育出世界首例含人類(lèi)突變H基因的模型豬,基本原理如圖。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/5 0:0:1組卷:21引用:2難度:0.6
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