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脂肪酶是目前應(yīng)用最為廣泛的工業(yè)用酶之一,主要用于食品工業(yè),如制備油脂、酒類的去混除渣,改善面包質(zhì)量等。脂肪酶廣泛存在于動植物和微生物中,研究人員從某城市下水道淤泥中篩選出具脂肪酶高產(chǎn)活性的菌株,并探究其適宜的發(fā)酵條件?;卮鹣铝袉栴}:
(1)如圖1為脂肪酶生產(chǎn)菌富集培養(yǎng)基的配方:
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按物理性質(zhì)劃分,富集培養(yǎng)基為
液體
液體
培養(yǎng)基,橄欖油的作用是為脂肪酶生產(chǎn)菌提供
碳源
碳源
,富集培養(yǎng)時需要進行搖床振蕩培養(yǎng),其目的是
可增加培養(yǎng)液的溶氧量,并促進菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸
可增加培養(yǎng)液的溶氧量,并促進菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸

(2)在純化分離的操作中,用接種環(huán)沾取一定量經(jīng)過富集的菌液,用平板劃線法接種時,第二次及以后的劃線,都要從上一次劃線的末端引線,原因是
使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落
使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落
,接種后,需要將平板倒置培養(yǎng),以防止
皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基,造成污染
皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基,造成污染
。
(3)初篩用橄欖油雙層瓊脂平板,平板底層含瓊脂和橄欖油,表層為肉汁胨瓊脂培養(yǎng)基。將用無菌水從(2)中平板沖下的菌液稀釋后,涂布到初篩培養(yǎng)基,挑選透明圈直徑與菌落的直徑之比
(填“大”或“小”)的菌落接種到肉汁胨斜面培養(yǎng)基上保藏。通過復(fù)篩,篩選出酶活性最高的菌種。
(4)研究人員繼續(xù)探究了pH對該脂肪酶活性的影響(所選為堿性脂肪酶),得到如圖2所示的實驗結(jié)果,堿性脂肪酶的活性測定可以采用平板測定法,其原理是利用堿性脂肪酶可以分解脂肪形成游離脂肪酸,脂肪酸可以使指示劑維多利亞藍變色,而產(chǎn)生變色圈,根據(jù)該原理,在本研究中,酶活性的測量指標是
變色圈直徑
變色圈直徑
,根據(jù)曲線,pH為
8.5
8.5
時,堿性脂肪酶活性最高。

【答案】液體;碳源;可增加培養(yǎng)液的溶氧量,并促進菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸;使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落;皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基,造成污染;大;變色圈直徑;8.5
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:1難度:0.6
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  • 1.飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì),很難被動物吸收利用,還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶,則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖。請分析作答。
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    (1)培養(yǎng)基中除了添加
     
    、
     
    以外,應(yīng)含有碳源、氮源、水、無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)。
    (2)對培養(yǎng)基進行滅菌常用的方法是
     
    。
    (3)接種前進行的一系列操作,目的是
     
    。統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。通常每種稀釋液需涂布3個平板,取其平均值,若將最后一個試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是a,則1g土壤中含有此菌的菌株數(shù)是
     
    。該方法統(tǒng)計獲得的菌落數(shù)比實際的活菌數(shù)
     
    ,原因是
     

    (4)若要對上述菌株進行進一步純化,通常使用的劃線工具是
     
    ;接種時,在第一區(qū)域劃線后須將該工具
     
    后再劃線。
    (5)產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣,菌落的周圍將形成透明的區(qū)域,根據(jù)透明區(qū)域的有無,可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶。實驗結(jié)果顯示A~E五種菌株中,
     
    是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株。

    發(fā)布:2024/10/29 4:30:2組卷:16引用:2難度:0.7
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    發(fā)布:2024/10/30 11:30:2組卷:26引用:3難度:0.7
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    發(fā)布:2024/10/30 10:30:2組卷:20引用:3難度:0.6
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