當(dāng)前位置： 2021-2022學(xué)年福建省廈門一中高二（下）期中生物試卷> 試題詳情

啟動(dòng)子可分為組成型啟動(dòng)子和誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。35S啟動(dòng)子是組成型啟動(dòng)子，能夠持續(xù)、高效地啟動(dòng)目的基因在植物各種組織中的表達(dá)，但往往也會(huì)阻礙植物的生長(zhǎng)發(fā)育；Rd29A啟動(dòng)子是一種逆境誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，沙冬青脫水素基因（AmDHN基因）能使植株具有較強(qiáng)的抗旱作用?？蒲腥藛T構(gòu)建Rd29A啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)AmDHN基因表達(dá)的載體，過程如圖1。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化“敖漢苜?！蹦秃敌缕贩N，以期在干旱地區(qū)發(fā)展首著產(chǎn)業(yè)。

請(qǐng)回答：
（1）科研人員擴(kuò)增Rd29A啟動(dòng)子所設(shè)計(jì)的引物如下，根據(jù)引物的堿基序列及限制酶的識(shí)別序列分析，構(gòu)建載體2時(shí)選用的限制酶是
SacI和SmaI
SacI和SmaI
為了提高構(gòu)建載體3的成功率，選用
BeII和SacI
BeII和SacI
酶切割載體1、2。
上游引物P1：5'-GACCCGGGTTTCCAAAGATTTTTTTC-3'
下游引物P2：5'-GAGAGCTCTGGGGTTTTGCTTTTGAATGT-3'
（2）載體5需先轉(zhuǎn)入
農(nóng)桿菌
農(nóng)桿菌
后再轉(zhuǎn)化苜蓿，轉(zhuǎn)化后應(yīng)在培養(yǎng)基中添加
新霉素
新霉素
以篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。
（3）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因苜蓿中AmDHN基因的轉(zhuǎn)錄水平，挑選10株轉(zhuǎn)基因植株，利用自來水和20%PEG（模擬干旱條件）處理8h,提取RNA通過RT-PCR檢測(cè)AmDHN基因和MtActin 基因（一種骨架蛋白基因）的表達(dá)水平，其結(jié)果如圖2：
選擇MtActin基因轉(zhuǎn)錄水平作為參照的依據(jù)是MtActin基因在各種細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)恒定。
②自來水處理和20%PEG條件下的AmDHN基因表達(dá)水平的差異說明：
干旱能誘導(dǎo)Rd29A啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄
干旱能誘導(dǎo)Rd29A啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．

【答案】SacI和SmaI；BeII和SacI；農(nóng)桿菌；新霉素；干旱能誘導(dǎo)Rd29A啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/5/12 8:0:9組卷：4引用：1難度：0.6

相似題

1．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是

。
（2）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外，還包括

、

、

，其中

與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關(guān)。
（3）當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是

。
（4）如何從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力？

。
（5）若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株，但植株抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是

。
發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7
解析
2．油菜是世界上重要的油料作物，其生長(zhǎng)期常受到病蟲害的危害，其中80%是由病原真菌引起。過去對(duì)油菜真菌病害的控制主要使用化學(xué)殺菌劑；真菌的細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)組成，現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因（如圖1）注入油菜（本身無幾丁質(zhì)酶基因）中從而提高油菜的抗真菌能力，該過程利用了限制性核酸內(nèi)切酶（如圖2）。請(qǐng)回答下列問題：

（1）據(jù)圖2寫出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列：

。形成重組DNA分子時(shí)，含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身

。
（2）將重組DNA導(dǎo)入油菜細(xì)胞的常用方法是

。為了檢測(cè)油菜細(xì)胞是否成功導(dǎo)入幾丁質(zhì)酶基因，可利用

制成的探針進(jìn)行檢測(cè)。
（3）將轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗，過程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中

的配比，幼苗可置于有

的環(huán)境中，檢測(cè)幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達(dá)。
（4）采用化學(xué)殺蟲劑在消滅真菌病害的同時(shí)，也污染了

（至少2種）等無機(jī)環(huán)境，更為重要的是使得

迅速減少。
發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7
解析

3．已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是（　　）

A．構(gòu)建重組DNA時(shí)，可分別用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割目的基因和質(zhì)粒

B．用限制酶切割上圖中含目的基因的DNA時(shí)，會(huì)有四個(gè)磷酸二酯鍵斷裂

C．限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割DNA后獲得的黏性末端不同

D．質(zhì)粒中的標(biāo)記基因便于篩選出目的基因已經(jīng)表達(dá)的細(xì)胞

發(fā)布：2024/10/31 13:0:2組卷：46引用：2難度：0.7

解析

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3．已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是（ ）

3．已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是（　　）