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苯丙酮尿癥是單基因遺傳病,科學(xué)家將正?;駾導(dǎo)入該病患者的細(xì)胞,以治療該病。圖甲為A、B、C三種質(zhì)粒,圖乙為含有目的基因D的DNA片段,圖丙為重組載體的示意圖。Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因,LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無該基因或該基因被破壞,則菌落呈白色。,EcoRI(0.6Kb)、PvuI(0.8Kb)為限制酶及其切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)之間的距離?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)基因工程操作的核心步驟是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
。圖甲中三種質(zhì)粒適宜作為運(yùn)載體的是質(zhì)粒
B
B
。
(2)獲取目的基因D時(shí)應(yīng)選擇乙圖中的
PvuⅠ
PvuⅠ
對其所在的DNA進(jìn)行切割。
(3)將目的基因D和甲圖中相應(yīng)質(zhì)粒連接后,得到圖丙中三種方式。為選出正向連接的重組質(zhì)粒,使用
EcoRⅠ
EcoRⅠ
對質(zhì)粒完全酶切后,進(jìn)行電泳分析。若是正向連接載體,電泳圖譜中出現(xiàn)長度為
1.2
1.2
Kb和
5.5
5.5
Kb兩條帶。
(4)利用自身不含lacZ基因且對抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,要在已轉(zhuǎn)化的含重組質(zhì)粒、已轉(zhuǎn)化的含空質(zhì)粒的受體細(xì)胞和未轉(zhuǎn)化成功的細(xì)胞中篩選出已轉(zhuǎn)化的含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞的方法是在含有
氨芐青霉素
氨芐青霉素
X-gal
X-gal
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),形成
白色
白色
(填“藍(lán)色”或“白色”)菌落的為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建;B;PvuⅠ;EcoRⅠ;1.2;5.5;氨芐青霉素;X-gal;白色
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:3引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí),先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     
    。
    (2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
     
    、
     
    、
     
    ,其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關(guān)。
    (3)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)如何從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力?
     

    (5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 2.油菜是世界上重要的油料作物,其生長期常受到病蟲害的危害,其中80%是由病原真菌引起。過去對油菜真菌病害的控制主要使用化學(xué)殺菌劑;真菌的細(xì)胞壁由幾丁質(zhì)組成,現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因(如圖1)注入油菜(本身無幾丁質(zhì)酶基因)中從而提高油菜的抗真菌能力,該過程利用了限制性核酸內(nèi)切酶(如圖2)。請回答下列問題:
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    (1)據(jù)圖2寫出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列:
     
    。形成重組DNA分子時(shí),含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
     
    。
    (2)將重組DNA導(dǎo)入油菜細(xì)胞的常用方法是
     
    。為了檢測油菜細(xì)胞是否成功導(dǎo)入幾丁質(zhì)酶基因,可利用
     
    制成的探針進(jìn)行檢測。
    (3)將轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗,過程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
     
    的配比,幼苗可置于有
     
    的環(huán)境中,檢測幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達(dá)。
    (4)采用化學(xué)殺蟲劑在消滅真菌病害的同時(shí),也污染了
     
    (至少2種)等無機(jī)環(huán)境,更為重要的是使得
     
    迅速減少。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:3引用:1難度:0.7
  • 3.已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是(  )
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    發(fā)布:2024/10/31 13:0:2組卷:46引用:2難度:0.7
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