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人乳鐵蛋白(hLF)對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開(kāi)展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究,主要流程如圖。RT-PCR過(guò)程需先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成DNA,然后再進(jìn)行PCR。圖中AseI、NheI、SalI、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點(diǎn),neor為新霉素抗性基因,BLG基因?yàn)锽乳鐵蛋白基因,GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因?;卮鹣铝袉?wèn)題:
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(1)過(guò)程①中用到的酶是
逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶
逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶
,經(jīng)過(guò)程①得到的hLH基因不具有的結(jié)構(gòu)是
啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子
啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子
(至少答出2個(gè))。
(2)過(guò)程②需要用
SalⅠ和BamHⅠ
SalⅠ和BamHⅠ
酶處理pEB質(zhì)粒和添加了相應(yīng)識(shí)別序列的hLH基因,已獲得重組質(zhì)粒。
(3)過(guò)程②中,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是
使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá))
使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá))
。GFP基因的作用是
用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞
用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞
。
(4)過(guò)程③中用到的脂質(zhì)體是由磷脂分子構(gòu)成的,脂質(zhì)體介導(dǎo)利用的原理是
膜的流動(dòng)性
膜的流動(dòng)性
。若要將hLF基因?qū)胫参锛?xì)胞中表達(dá),可采用的方法有
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法
(答2種)。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶;啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子;SalⅠ和BamHⅠ;使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá));用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞;膜的流動(dòng)性;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:1引用:2難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫(xiě)下列編號(hào))。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過(guò)程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開(kāi),才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿(mǎn)載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段,見(jiàn)圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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