孔雀石綠(簡(jiǎn)稱MG)是廣泛使用的有機(jī)染料,在自然環(huán)境中極難降解,容易引起土壤污染,進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低,含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明。
(1)培養(yǎng)基的配制:MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等,再加
MG
MG
作為唯一碳源,該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基,選擇培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng) 以MG作為唯一碳源
以MG作為唯一碳源
。利用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),MG高效降解菌株增殖速度比在固體培養(yǎng)基中快,原因是 目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
。培養(yǎng)基配制好后,需要用 高溫蒸汽滅菌
高溫蒸汽滅菌
法進(jìn)行滅菌處理。
(2)MG高效降解菌株的分離和純化:圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是 稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
。某同學(xué)取三個(gè)平板,在每個(gè)平板上涂布0.2mL最終稀釋后的菌液,三個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為186、192、180個(gè),初步估測(cè)A中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為9.3×108個(gè)/mL,分析該同學(xué)將A中的菌液稀釋了 106
106
倍。
(3)MG高效降解菌株的鑒定:將純化獲得的菌種接種于含過量MG的固體培養(yǎng)基(其他營(yíng)養(yǎng)成分等適宜)上,根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn) 透明圈
透明圈
,就可以鑒別出目的菌株,原因是 目的菌株通過降解MG生長(zhǎng),使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈
目的菌株通過降解MG生長(zhǎng),使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈
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