COVID-19的抗原性與感染性與其表面的S蛋白（刺突糖蛋白）密切相關(guān)，現(xiàn)利用基因工程的方法生產(chǎn)相關(guān)疫苗。圖甲為構(gòu)建S蛋白基因表達(dá)載體的過(guò)程，圖乙為重組質(zhì)粒被相關(guān)酶切后的電泳結(jié)果。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

（1）①過(guò)程所使用的酶為
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
，為保證PCR技術(shù)擴(kuò)增S蛋白基因正常進(jìn)行，該反應(yīng)體系的主要成分有
模板DNA、dNTP、引物、Taq酶
模板DNA、dNTP、引物、Taq酶
。PCR技術(shù)中低溫復(fù)性的目的是
引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈
引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈
。
（2）通過(guò)PCR技術(shù)可在cDNA分子中專(zhuān)一性擴(kuò)增出S蛋白基因，其原因是
引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的
引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的
。PCR過(guò)程經(jīng)過(guò)4次循環(huán)，需要的引物的數(shù)量是
30
30
個(gè)。
（3）構(gòu)建好的重組質(zhì)粒長(zhǎng)度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分別對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行切割并電泳，結(jié)果如圖乙所示，可推測(cè)BamHⅠ在重組質(zhì)粒上有
3
3
個(gè)酶切位點(diǎn)。為使S蛋白基因在受體細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把S蛋白基因正確插入重組質(zhì)粒的
啟動(dòng)子和終止子
啟動(dòng)子和終止子
之間。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶；模板DNA、dNTP、引物、Taq酶；引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的；30；3；啟動(dòng)子和終止子

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.4

相似題

1．某實(shí)驗(yàn)室利用PCR技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因品種進(jìn)行目的基因檢測(cè)，反應(yīng)程序如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．兩條子鏈的合成都是從5'端向3'端延伸

B．后延伸過(guò)程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分

C．PCR產(chǎn)物DNA堿基序列的特異性體現(xiàn)了Taq酶的特異性

D．預(yù)變性時(shí)引物之間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)則不能擴(kuò)增目的基因

發(fā)布：2024/11/2 14:0:2組卷：5引用：2難度：0.6

A．RT-PCR所用的酶包括逆轉(zhuǎn)錄酶和熱穩(wěn)定RNA聚合酶

B．RT-PCR所用的兩引物序列不同，兩者間可進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)

C．RT-PCR過(guò)程中需添加ATP，反應(yīng)過(guò)程中會(huì)有磷酸鍵斷裂

D．至少經(jīng)過(guò)2次循環(huán)，方可獲取與目的基因等長(zhǎng)的DNA單鏈

發(fā)布：2024/10/31 0:0:1組卷：4引用：1難度：0.6

A．PCR技術(shù)中復(fù)性是當(dāng)溫度下降到65℃時(shí)，兩種引物與兩條DNA單鏈結(jié)合的過(guò)程

B．反應(yīng)體系中dNTP作為擴(kuò)增的原料，會(huì)依次連接到子鏈的5′端

C．反應(yīng)體系中引物的G，C堿基含量越高越好，因?yàn)樵礁咭锝Y(jié)合的特異性越強(qiáng)

D．原位PCR反應(yīng)體系中使用的Mg²⁺濃度要比常規(guī)PCR高

發(fā)布：2024/10/31 21:0:2組卷：10引用：3難度：0.7

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