除草劑的有效成分草甘膦能夠?qū)Ｒ坏囊种艵PSP合成酶的活性，從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而死亡。草甘膦起作用時(shí)沒有選擇性，它在除掉雜草的同時(shí)也會使作物受損。解決這個問題的有效方法是培育抗草甘膦作物。如圖是培育抗草甘膦棉的流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）PCR擴(kuò)增是獲取和擴(kuò)增目的基因的常用方法，該方法的基本原理是

DNA雙鏈復(fù)制

DNA雙鏈復(fù)制

，擴(kuò)增過程中新形成的DNA單鏈的合成是

連續(xù)

連續(xù)

（填“連續(xù)”或“不連續(xù)”）的。
（2）培育過程中利用的限制酶必須滿足的基本條件是：

不破壞目的基因和質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)；在Ti質(zhì)粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點(diǎn)

不破壞目的基因和質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)；在Ti質(zhì)粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點(diǎn)

（答兩點(diǎn)）、目的基因兩側(cè)有該限制酶的識別位點(diǎn)。根據(jù)來源不同，可將基因工程中的DNA連接酶分為

E?coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

E?coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶

兩大類。
（3）若圖中細(xì)菌X是農(nóng)桿菌，導(dǎo)入重組基因表達(dá)載體前需先用CaCl₂處理，其目的是

使農(nóng)桿菌處于感受態(tài)，容易從外界吸收DNA

使農(nóng)桿菌處于感受態(tài)，容易從外界吸收DNA

，后將其接種到液體培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)10～12h,其目的是

擴(kuò)大培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌

擴(kuò)大培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌

。農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)的Ti質(zhì)粒上的T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染宿主細(xì)胞內(nèi)，并整合到

宿主細(xì)胞的染色體DNA

宿主細(xì)胞的染色體DNA

上；處理Y能成功的原因是

植物細(xì)胞具有全能性

植物細(xì)胞具有全能性

。