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棉鈴蟲載脂蛋白受體(LpR)在昆蟲體內(nèi)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運中發(fā)揮重要作用。為了明確載脂蛋白受體(LpR)基因在其卵巢發(fā)育及饑餓脅迫中的功能,科研人員研究了棉鈴蟲不同發(fā)育階段以及饑餓處理對該基因表達的影響。這有助于解析載脂蛋白受體(LpR)基因參與棉鈴蟲卵巢發(fā)育過程中脂質(zhì)轉(zhuǎn)運以及應對饑餓脅迫的作用。請回答下列問題:
(1)獲取棉鈴蟲載脂蛋白受體(LpR)基因:將棉鈴蟲樣品置于預冷的研缽內(nèi),加入液氮研磨成粉末后迅速提取
總RNA(RNA)
總RNA(RNA)
,經(jīng)
逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)
逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)
得到cDNA。
(2)體外擴增棉鈴蟲載脂蛋白受體(LpR)基因:
①PCR加樣操作:將上述cDNA作為PCR反應的模板,并設計一對特異性引物來擴增目的基因,該PCR反應體系中除模板和引物外,還需加入緩沖液(含Mg2+)、
TaqDNA聚合酶
TaqDNA聚合酶
、
4種脫氧核苷酸
4種脫氧核苷酸
H2O等。
②設置PCR反應程序:PCR每次循環(huán)一般可以分為
變性
變性
、
復性
復性
和延伸三步,在延伸過程中,脫氧核苷酸連接在引物的
3'
3'
端。
(3)PCR結(jié)果分析:
菁優(yōu)網(wǎng)
①圖1為棉鈴蟲載脂蛋白受體(LpR)基因在棉鈴蟲不同發(fā)育階段的表達情況。據(jù)圖可發(fā)現(xiàn),棉鈴蟲載脂蛋白受體(LpR)基因在
雌成蟲(F)
雌成蟲(F)
中高表達,推測棉鈴蟲載脂蛋白受體(LpR)可能與雌蟲的生殖行為相關(guān);同樣的,該基因在卵內(nèi)也高表達,這可能與
脂質(zhì)
脂質(zhì)
作為胚胎發(fā)育期的重要營養(yǎng)物質(zhì)相關(guān)。
②圖2為饑餓脅迫對棉鈴蟲雌成蟲卵巢中載脂蛋白受體(LpR)基因表達的影響,據(jù)圖推測饑餓脅迫處理導致昆蟲產(chǎn)卵量降低可能跟
載脂蛋白受體(LpR)基因表達受到抑制,從而減少了卵巢對脂質(zhì)的攝入
載脂蛋白受體(LpR)基因表達受到抑制,從而減少了卵巢對脂質(zhì)的攝入
有關(guān)。

【答案】總RNA(RNA);逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄);TaqDNA聚合酶;4種脫氧核苷酸;變性;復性;3';雌成蟲(F);脂質(zhì);載脂蛋白受體(LpR)基因表達受到抑制,從而減少了卵巢對脂質(zhì)的攝入
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.城市降雨徑流中含多種污染物,其中有機物多環(huán)芳烴(PAHs)具有極強生物毒性,常積累于路邊滯留池中,產(chǎn)生持久的生態(tài)風險。研究者構(gòu)建了一種高效降解PAHs的工程菌用于生態(tài)修復。
    (1)生態(tài)修復效果除受工程菌的降解能力限制外,還與工程菌和本地微生物之間的
     
    等有關(guān)。研究者調(diào)研滯留池中PAHs種類,發(fā)現(xiàn)以芘為主。將滯留池土壤溶液接種于添加芘的培養(yǎng)基中,篩選獲得三種菌株,再分別接種于芘作唯一碳源的培養(yǎng)基中,均無法形成菌落,說明三者均對芘有一定的
     
    ,但無法降解芘。最終篩選獲得基因工程改造的受體菌。
    (2)將控制高效降解PAHs的RHD基因與綠色熒光蛋白基因(CFP基因)融合后構(gòu)建重組質(zhì)粒,導入受體菌獲得工程菌。分別提取工程菌的擬核DNA與質(zhì)粒,PCR結(jié)果如圖1,可知目的基因
     

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    (3)將工程菌培養(yǎng)在以芘為唯一碳源的培養(yǎng)基中,檢測熒光強度及芘含量隨時間的變化,結(jié)果如圖2。
    據(jù)圖可知,熒光強度可作為工程菌降解芘的指標,依據(jù)是
     
    。
    (4)工程菌在特定條件下自毀可降低生態(tài)風險。利用以下材料,提出可自毀的工程菌的設計思路。
    T質(zhì)粒,核酸水解酶基因(nuc基因),lac啟動子,IPTG(可誘導lac啟動子啟動轉(zhuǎn)錄)
     
    。
    (5)后續(xù)評價了可自毀工程菌對微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。綜合上述研究,完善技術(shù)路線圖。
     

    發(fā)布:2024/11/7 19:30:1組卷:41引用:1難度:0.6
  • 2.玉米是重要的糧食作物、飼料和工業(yè)原料,而蟲害是造成玉米產(chǎn)量減少的重要因素。研究人員從蘇云金芽孢桿菌中克隆獲得crylAh基因(抗蟲基因),并將該基因轉(zhuǎn)入玉米細胞中,再通過對轉(zhuǎn)基因玉米進行抗蟲性篩選,獲得對玉米螟高抗的轉(zhuǎn)基因玉米HGK60?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR獲取crylAh基因時需要在緩沖溶液中進行,同時提供DNA模板、引物以及
     
    (答出2種)等,其中引物的作用是
     
    。PCR循環(huán)中,溫度上升到90℃以上的目的是
     
    。
    (2)研究人員為檢測轉(zhuǎn)基因玉米HGK60的遺傳特性,讓該玉米雜交獲得2種品系HGK60—甲、HGK60—乙。研究人員對轉(zhuǎn)基因玉米和非轉(zhuǎn)基因玉米中的crylAh蛋白表達情況進行了檢測,其中非轉(zhuǎn)基因玉米中未檢測到cry1Ah蛋白,而甲、乙品系均檢測到了crylAh蛋白,該種檢測方法的原理是
     
    ,該檢測結(jié)果說明
     
    。
    (3)研究人員進一步對甲、乙2種品系的轉(zhuǎn)基因玉米進行抗蟲性鑒定,相關(guān)實驗結(jié)果如圖所示。
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    ①對2種品系的轉(zhuǎn)基因玉米進行抗蟲性鑒定,這屬于
     
    水平的鑒定。
    ②據(jù)圖分析,能否初步說明甲、乙2種品系具有良好的抗蟲性?
     
    ,判斷依據(jù)是
     
    。

    發(fā)布:2024/11/2 8:30:1組卷:36引用:3難度:0.5
  • 3.我國科學家利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)將150CAG重復序列精確地插入豬成纖維細胞內(nèi)的亨廷頓蛋白(HTT)內(nèi)源性基因中,并成功培育出世界首例含人類突變H基因的模型豬,基本原理如圖。下列相關(guān)說法正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/5 0:0:1組卷:21引用:2難度:0.6
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