酵母菌的轉(zhuǎn)錄因子蛋白由BD和AD兩部分組成且結(jié)合在一起。BD負(fù)責(zé)與啟動子上游序列結(jié)合，AD負(fù)責(zé)激活啟動子轉(zhuǎn)錄。只有AD和BD同時存在且結(jié)合在一起時才能保證基因M的轉(zhuǎn)錄（如圖所示）?；騇能表達(dá)時，酵母菌才能在缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上生長。

（1）酵母菌培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、

氮源

氮源

和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，在酵母菌的純培養(yǎng)過程中，采用

平板劃線法或稀釋涂布平板

平板劃線法或稀釋涂布平板

法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上。
（2）將BD與AD分開，BD基因與X基因共連一個載體，可表達(dá)出BD-X融合蛋白；AD基因與Y基因共連一個載體，可表達(dá)出AD-Y融合蛋白。將兩個載體同時導(dǎo)入一個酵母細(xì)胞中，可以檢測X蛋白與Y蛋白是否存在相互作用（即是否可以結(jié)合），這種檢測方法稱為酵母雙雜交。
①從到酵母細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，進(jìn)行

抗原-抗體

抗原-抗體

雜交，以檢測是否產(chǎn)生M蛋白。若將酵母菌培養(yǎng)在

缺乏組氨酸

缺乏組氨酸

培養(yǎng)基中，酵母菌仍然可以生長，則說明

X蛋白與Y蛋白存在相互作用

X蛋白與Y蛋白存在相互作用

。
②在酵母雙雜交的檢測中可能出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，原因是

X蛋白具有激活啟動子轉(zhuǎn)錄的活性（或X蛋白具有激活啟動子轉(zhuǎn)錄的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能）

X蛋白具有激活啟動子轉(zhuǎn)錄的活性（或X蛋白具有激活啟動子轉(zhuǎn)錄的功能或X蛋白具有AD蛋白的功能）

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