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小白鼠因其具有容易飼養(yǎng)，繁殖率高，遺傳上有較高的純合度，代謝類型、生理病理特征與人類接近，全基因序列和人類高度相似，染色體數(shù)與人類非常接近等系列特征而成為人類實驗研究的重要對象。據(jù)統(tǒng)計，全球每年有超過1億的小白鼠被用來當(dāng)作實驗樣本，它們可以說為人類醫(yī)學(xué)作出了巨大的貢獻。如圖1是科研人員利用小白鼠單倍體ES細胞（只有一個染色體組），成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠的主要技術(shù)流程，請分析回答下列問題：
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注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點：Amp′是氨芐青霉素抗性基因，Neo′是G418抗性基因。
（1）利用PCR技術(shù)可以獲取和擴增目的基因。在PCR反應(yīng)體系中，除含有緩沖液、模板DNA、4種脫氧核苷酸、引物外，還應(yīng)含有
Taq酶
Taq酶
；引物應(yīng)選用圖2中的
B和C
B和C
（填圖中字母，字母表示引物）。
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（2）已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細胞。結(jié)合圖中推測，過程①選用的2種限制酶是
Ⅰ和Ⅱ
Ⅰ和Ⅱ
（填圖中的編號），③處的培養(yǎng)液中應(yīng)添加
G418
G418
（填“氨芐青霉素”或“G418”）。
（3）圖中過程④的本質(zhì)相當(dāng)于動物的受精作用。在胚胎工程操作中，常以觀察到
兩個極體
兩個極體
作為受精的標志。圖中的桑葚胚需經(jīng)
胚胎移植
胚胎移植
技術(shù)才能形成轉(zhuǎn)基因小鼠，若需獲得更多遺傳性狀相同的轉(zhuǎn)基因小鼠，可在該操作前對桑葚胚進行
胚胎分割
胚胎分割
，該技術(shù)所需要的主要儀器設(shè)備為
實體顯微鏡和顯微操作儀
實體顯微鏡和顯微操作儀
。

【答案】Taq酶；B和C；Ⅰ和Ⅱ；G418；兩個極體；胚胎移植；胚胎分割；實體顯微鏡和顯微操作儀
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：3難度：0.7
相似題

  • 1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗?；卮鹣铝袉栴}：
    （1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了
     
    。
    （2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達載體，還需要使用的酶是
     
    （答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    （答出3種）等結(jié)構(gòu)。
    （3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析，該實驗結(jié)果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結(jié)果
    ① ② ③
    轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組） 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品    		 將TI注射到大白
    兔體內(nèi)，獲取TI
    抗體    		 讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測    		 有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組） 無雜交帶
    陽性對照組（C組） 有雜交帶

    發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

  • 菁優(yōu)網(wǎng)2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    （3）導(dǎo)入目的基因時，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測受體細胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7
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