重組PCR技術(shù)是一項新的PCR技術(shù)，通過重組PCR技術(shù)能將兩個不同的DNA連接成為一個新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴增得到LTB和ST1兩個基因片段，利用重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB—ST1融合基因，制備過程如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中，向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)除了引物和模板鏈外，還需要加入

耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸（或Taq酶和dNTP）

耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸（或Taq酶和dNTP）

。利用PCR技術(shù)擴增目的基因，依據(jù)的生物學(xué)原理是

DNA雙鏈復(fù)制

DNA雙鏈復(fù)制

。
（2）從P2、P3兩種引物的角度分析，LTB和ST1基因能夠融合的關(guān)鍵是

這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對

這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對

。PCR1和PCR2不能在同一個反應(yīng)體系中進行，原因是

P2和P3能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程

P2和P3能結(jié)合，會干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過程

。②過程不需要加入引物，原因是

兩條母鏈可作為合成子鏈的引物

兩條母鏈可作為合成子鏈的引物

。
（3）科研小組為了檢測是否成功構(gòu)建出融合基因，將反應(yīng)后體系中的各種DNA分子進行電泳，結(jié)果如圖2所示。則融合基因最可能是

3

3

，判斷依據(jù)是

融合基因包含2個不同的基因，其分子量較大，3表示的DNA分子量最大（或1和2與M中堿基對數(shù)為1000bp和2500bp的對照基因的電泳結(jié)果相同，3的堿基對數(shù)大約是1和2的堿基對數(shù)之和）

融合基因包含2個不同的基因，其分子量較大，3表示的DNA分子量最大（或1和2與M中堿基對數(shù)為1000bp和2500bp的對照基因的電泳結(jié)果相同，3的堿基對數(shù)大約是1和2的堿基對數(shù)之和）

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