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腫瘤血管生長是腫瘤生長的關(guān)鍵環(huán)節(jié),血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一種參與促進(jìn)腫瘤血管生長的蛋白質(zhì),VEGF作為治療癌癥的靶分子受到了很多研究者的關(guān)注。
(1)VEGF 的受體存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的
細(xì)胞膜上
細(xì)胞膜上
,可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的
分裂分化
分裂分化
,形成的細(xì)胞最終構(gòu)成新的血管。
(2)研究者利用噬菌體文庫篩選能與VEGF特異性結(jié)合的多肽。過程如下。
①將人工合成的編碼隨機(jī)六肽的基因插入噬菌體DNA,形成重組DNA分子,用重組DNA分子轉(zhuǎn)化大腸桿菌,大腸桿菌經(jīng)培養(yǎng)后裂解,產(chǎn)生噬菌體。這些噬菌體構(gòu)成一個(gè)文庫,一個(gè)包含所有可能六肽的噬菌體文庫至少有
206或64,000,000
206或64,000,000
種噬菌體組成,在這些噬菌體中可能有某種六肽能與VEGF特異性結(jié)合(圖一)。
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②將VEGF能夠與受體結(jié)合的部位固定在微孔容器底部,在微孔中加入隨機(jī)肽文庫,一段時(shí)間后用緩沖液洗去不能與VEGF結(jié)合的噬菌體,然后用含有
VEGF或目標(biāo)分子
VEGF或目標(biāo)分子
的緩沖液將結(jié)合在微孔底部的噬菌體洗脫下來,這種分子能夠與微孔容器底部的分子競爭性結(jié)合噬菌體,這說明噬菌體與目標(biāo)分子的結(jié)合是
可逆
可逆
(可逆或不可逆)的。
③將洗脫下來的噬菌體轉(zhuǎn)入另一試管,加入
大腸桿菌培養(yǎng)液
大腸桿菌培養(yǎng)液
,經(jīng)過一段時(shí)間振蕩培養(yǎng),產(chǎn)生新一代噬菌體庫。
④重復(fù)步驟②③多次。
(3)在多輪實(shí)驗(yàn)后產(chǎn)生的噬菌體文庫比第一代噬菌體文庫與VEGF的結(jié)合能力更強(qiáng),文庫中噬菌體的種類
更少(或更單一)
更少(或更單一)
,請分析原因:
只有少數(shù)能與目標(biāo)分子結(jié)合的噬菌體才能繁殖產(chǎn)生下一代文庫,隨著傳代和選擇次數(shù)增加,競爭性結(jié)合能力最強(qiáng)的幾種噬菌體被選擇出來
只有少數(shù)能與目標(biāo)分子結(jié)合的噬菌體才能繁殖產(chǎn)生下一代文庫,隨著傳代和選擇次數(shù)增加,競爭性結(jié)合能力最強(qiáng)的幾種噬菌體被選擇出來
。
(4)欲證明篩選到的多肽X能夠起到抑制腫瘤生長的作用,研究者設(shè)計(jì)了這樣的實(shí)驗(yàn):將多肽X溶液注射到?只腫瘤模型小鼠體內(nèi),(腫瘤型鼠是天然條件下就會產(chǎn)生腫瘤的小鼠品系),檢測VEGF與VEGF受體的結(jié)合能力。請對該實(shí)驗(yàn)做出評價(jià)并加以完善
該實(shí)驗(yàn)方案存在缺陷,1、應(yīng)選擇多只各方面狀態(tài)相似的腫瘤模型小鼠,2、應(yīng)分為兩組,其中一組注射X肽,另一組注射其他六肽,3、應(yīng)檢測腫瘤大小或多少
該實(shí)驗(yàn)方案存在缺陷,1、應(yīng)選擇多只各方面狀態(tài)相似的腫瘤模型小鼠,2、應(yīng)分為兩組,其中一組注射X肽,另一組注射其他六肽,3、應(yīng)檢測腫瘤大小或多少

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】細(xì)胞膜上;分裂分化;206或64,000,000;VEGF或目標(biāo)分子;可逆;大腸桿菌培養(yǎng)液;更少(或更單一);只有少數(shù)能與目標(biāo)分子結(jié)合的噬菌體才能繁殖產(chǎn)生下一代文庫,隨著傳代和選擇次數(shù)增加,競爭性結(jié)合能力最強(qiáng)的幾種噬菌體被選擇出來;該實(shí)驗(yàn)方案存在缺陷,1、應(yīng)選擇多只各方面狀態(tài)相似的腫瘤模型小鼠,2、應(yīng)分為兩組,其中一組注射X肽,另一組注射其他六肽,3、應(yīng)檢測腫瘤大小或多少
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:31引用:2難度:0.6
相似題
  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是
     
    。
    (3)導(dǎo)入目的基因時(shí),首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細(xì)胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 2.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測,相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明
     
    組別 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 3.我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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