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人溶菌酶(hLTF)是人乳汁中重要的抗菌蛋白。某團(tuán)隊(duì)將hLTF基因連接到質(zhì)粒載體中構(gòu)建了hLTF基因表達(dá)載體,通過(guò)構(gòu)建轉(zhuǎn)基因羊乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)抗菌蛋白。請(qǐng)回答:
(1)為實(shí)現(xiàn)hLTF基因的大量擴(kuò)增,可利用圖1中的引物
②③
②③
組合進(jìn)行PCR.為保證hLTF基因和表達(dá)載體的充分連接,PCR擴(kuò)增時(shí),應(yīng)在基因上、下游引物的
5′
5′
端分別添加相應(yīng)的酶切位點(diǎn),且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn),主要目的是
使DNA片段能定向插入表達(dá)載體,減少自連
使DNA片段能定向插入表達(dá)載體,減少自連
。
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(2)Cre/loxp位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)可實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因受體細(xì)胞染色體(DNA)上基因的定點(diǎn)整合和重組。重組酶Cre能識(shí)別特異的DNA序列,即loxP位點(diǎn),使loxP位點(diǎn)間的基因序列被刪除或重組,Cre/loxp介導(dǎo)三種不同的重組反應(yīng)。(如圖2)
①loxP位點(diǎn)是一段DNA序列,包括兩個(gè)反向重復(fù)序列和一個(gè)不對(duì)稱的間隔區(qū)組成反向重復(fù)序列是Cre重組酶的特異識(shí)別位點(diǎn),而間隔區(qū)域決定了loxP位點(diǎn)的方向。Cre酶能特異性地識(shí)別反向重復(fù)序列并在特定位置切開(kāi)磷酸二酯鍵,其功能類(lèi)似于基因工程中的
限制
限制
酶。
②如果三種重組反應(yīng)均發(fā)生在染色體上,可能會(huì)導(dǎo)致染色體上基因的
缺失、倒位和易位
缺失、倒位和易位
,重組反應(yīng)的結(jié)果取決于
loxP位點(diǎn)的位置、同一染色體(DNA)上loxP位點(diǎn)的方向
loxP位點(diǎn)的位置、同一染色體(DNA)上loxP位點(diǎn)的方向

(3)構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器的方法有多種,一是通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)將重組基因?qū)氲绞芫阎校蛊渖L(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:二是通過(guò)轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器。兩種方法獲得的胚胎都要借助
早期胚胎培養(yǎng)
早期胚胎培養(yǎng)
技術(shù)和
胚胎移植
胚胎移植
技術(shù)才能獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物個(gè)體。

【答案】②③;5′;使DNA片段能定向插入表達(dá)載體,減少自連;限制;缺失、倒位和易位;loxP位點(diǎn)的位置、同一染色體(DNA)上loxP位點(diǎn)的方向;早期胚胎培養(yǎng);胚胎移植
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:20引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/11/2 8:0:46組卷:22引用:1難度:0.7
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    (1)研究人員利用PCR獲取crylAh基因時(shí)需要在緩沖溶液中進(jìn)行,同時(shí)提供DNA模板、引物以及
     
    (答出2種)等,其中引物的作用是
     
    。PCR循環(huán)中,溫度上升到90℃以上的目的是
     
    。
    (2)研究人員為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米HGK60的遺傳特性,讓該玉米雜交獲得2種品系HGK60—甲、HGK60—乙。研究人員對(duì)轉(zhuǎn)基因玉米和非轉(zhuǎn)基因玉米中的crylAh蛋白表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè),其中非轉(zhuǎn)基因玉米中未檢測(cè)到cry1Ah蛋白,而甲、乙品系均檢測(cè)到了crylAh蛋白,該種檢測(cè)方法的原理是
     
    ,該檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明
     

    (3)研究人員進(jìn)一步對(duì)甲、乙2種品系的轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行抗蟲(chóng)性鑒定,相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。
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    ①對(duì)2種品系的轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行抗蟲(chóng)性鑒定,這屬于
     
    水平的鑒定。
    ②據(jù)圖分析,能否初步說(shuō)明甲、乙2種品系具有良好的抗蟲(chóng)性?
     
    ,判斷依據(jù)是
     

    發(fā)布:2024/11/2 8:30:1組卷:36引用:3難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/5 0:0:1組卷:21引用:2難度:0.6
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