在新冠病毒(2019-nCoV)蔓延的2020年,快速研制新冠病毒(2019-nCoV)疫苗成為有效遏制疫情的重要手段,基因工程是研制疫苗的手段之一、具體實(shí)驗(yàn)思路為通過逆轉(zhuǎn)錄獲得2019-nCoV表面抗原的基因,再將其插入腺病毒中,做出以腺病毒為載體的重組疫苗。請(qǐng)回答下列問題:
(1)首先要通過
PCR
PCR
技術(shù)在體外對(duì)獲得的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。
(2)在目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前需要構(gòu)建基因表達(dá)載體
基因表達(dá)載體
,此過程所需的工具酶有限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶
限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶
。
(3)一般會(huì)用兩種不同的酶切割2019-nCoV基因和運(yùn)載體DNA來獲得不同的黏性末端,這樣做的好處是避免目的基因和運(yùn)載體DNA發(fā)生自身環(huán)化
避免目的基因和運(yùn)載體DNA發(fā)生自身環(huán)化
。
(4)重組疫苗是利用改造后的腺病毒和新型冠狀病毒的S蛋白編碼基因拼裝得到的腺病毒載體疫苗。疫苗注射入人體后,免疫系統(tǒng)會(huì)識(shí)別出病毒抗原,產(chǎn)生抗病毒免疫反應(yīng)。腺病毒作為運(yùn)載體受到了科學(xué)家的青睞,理由是有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制;有標(biāo)記基因;對(duì)受體細(xì)胞無毒害作用
有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制;有標(biāo)記基因;對(duì)受體細(xì)胞無毒害作用
(寫出兩點(diǎn))。